Dergiler / Selçuk Tıp Dergisi / 2001 / Cilt: 17 - Sayı: 2
Sıçan duyusal sinir hücre kültüründe voltaj bağımlı kalsiyum kanal akımlarının kalsiyum bağımlı düşüşü
- Dergi
- Selçuk Tıp Dergisi
- Sayfa
- 99–104
- DOI
- —
Özet
Bu çalismanin amaci siçan dorsal kök gangliyon (DKG) sinir hücre kültüründe yüksek voltajla aktive olan kalsiyum kanal (YVKK) akimi pik amplitütüne aktivasyon sikligi, hücre içi ve hücre disi $Ca^{2+}$ düzeylerinin etkilerini arastirmakti. Siçan DKG hücre kültürleri tüm hücre patch kenetleme tekniginin voltaj kenetleme formu kullanilarak -90 miliVoltta (mV) voltaj kenetlendi. Voltaj bagimli kalsiyum kanal akimlari (ICa) farmakolojik ve biyofiziksel olarak izole edildi. YVKK akimlari sadece biyofiziksel olarak T ve N tipi kalsiyum kanal akimlarindan ayirt edildi; YVKK akimlari kendi arasinda farmakolojik ve biyofiziksel olarak alt tip (L, P, Q, R) ayrimi yapilmadi. Hücre disi $Ca^{2+}$ konsantrasyonu 2 mM'dan 4 mM'a çikartilarak ve $Ca^{2+}$ yerine elektriksel yük tasiyici olarak $Ba^{2+}$ kullanilarak ekstraselüler $Ca^{2+}$'un etkisi; hücre içi $Ca^{2+}$ baglama kapasitesi artirilarak hücre içi $Ca^{2+}$'un etkisi arastirildi. Sonuç olarak, bu hücrelerde hücre disi $Ca^{2+}$ miktarindaki artisin YVKK akimi amplitüdünü artirdigi, hücre içi serbest $Ca^{2+}$ miktarindaki artisin ise YVKK akimi amplitüdünü düsürdügü tespit edildi.
Abstract
The aim of this study was to investigate the effects of activation frequency, intracellular and extracellular $Ca^{2+}$ concentrations on high voltage-activated calcium current (HVA ICa) amplitude in cultured rat dorsal root ganglion (DRG) neurones. Rat DRG neurones were voltage clamped at -90 mV using the whole cell configuration of the patch clamp technique. Voltage-activated calcium currents were pharmacologically and biophysically isolated. HVA calcium channel currents were identified and biophysically separated from low voltage activated L and T type calcium currents but no attempts were made for distinguishing between HVA ICa subtypes (L, P, Q, R). The effects of extracellular $Ca^{2+}$ concentration was assessed by raising extracellular $Ca^{2+}$ concentration from 2 mM to 4 mM and using $Ba^{2+}$ in extracellular recording medium as a charge carrier instead of $Ca^{2+}$, whereas intracellular $Ca^{2+}$ chelating capacity was raised for assessing the effects of intracellular $Ca^{2+}$. In conclusion, increases in extracellular $Ca^{2+}$ concentration causes increase in HVA ICa amplitude, but increases in intracellular free $Ca^{2+}$ levels causes "run-down" in this ICa amplitude.