Journals / Selçuk Tıp Dergisi / 2001 / Cilt: 17 - Sayı: 2
Calcium-dependent "Run down" of voltage-activated calcium currents in cultured sensory neurones from rat
- Journal
- Selçuk Tıp Dergisi
- Pages
- 99–104
- DOI
- —
Abstract
The aim of this study was to investigate the effects of activation frequency, intracellular and extracellular $Ca^{2+}$ concentrations on high voltage-activated calcium current (HVA ICa) amplitude in cultured rat dorsal root ganglion (DRG) neurones. Rat DRG neurones were voltage clamped at -90 mV using the whole cell configuration of the patch clamp technique. Voltage-activated calcium currents were pharmacologically and biophysically isolated. HVA calcium channel currents were identified and biophysically separated from low voltage activated L and T type calcium currents but no attempts were made for distinguishing between HVA ICa subtypes (L, P, Q, R). The effects of extracellular $Ca^{2+}$ concentration was assessed by raising extracellular $Ca^{2+}$ concentration from 2 mM to 4 mM and using $Ba^{2+}$ in extracellular recording medium as a charge carrier instead of $Ca^{2+}$, whereas intracellular $Ca^{2+}$ chelating capacity was raised for assessing the effects of intracellular $Ca^{2+}$. In conclusion, increases in extracellular $Ca^{2+}$ concentration causes increase in HVA ICa amplitude, but increases in intracellular free $Ca^{2+}$ levels causes "run-down" in this ICa amplitude.
Özet
Bu çalismanin amaci siçan dorsal kök gangliyon (DKG) sinir hücre kültüründe yüksek voltajla aktive olan kalsiyum kanal (YVKK) akimi pik amplitütüne aktivasyon sikligi, hücre içi ve hücre disi $Ca^{2+}$ düzeylerinin etkilerini arastirmakti. Siçan DKG hücre kültürleri tüm hücre patch kenetleme tekniginin voltaj kenetleme formu kullanilarak -90 miliVoltta (mV) voltaj kenetlendi. Voltaj bagimli kalsiyum kanal akimlari (ICa) farmakolojik ve biyofiziksel olarak izole edildi. YVKK akimlari sadece biyofiziksel olarak T ve N tipi kalsiyum kanal akimlarindan ayirt edildi; YVKK akimlari kendi arasinda farmakolojik ve biyofiziksel olarak alt tip (L, P, Q, R) ayrimi yapilmadi. Hücre disi $Ca^{2+}$ konsantrasyonu 2 mM'dan 4 mM'a çikartilarak ve $Ca^{2+}$ yerine elektriksel yük tasiyici olarak $Ba^{2+}$ kullanilarak ekstraselüler $Ca^{2+}$'un etkisi; hücre içi $Ca^{2+}$ baglama kapasitesi artirilarak hücre içi $Ca^{2+}$'un etkisi arastirildi. Sonuç olarak, bu hücrelerde hücre disi $Ca^{2+}$ miktarindaki artisin YVKK akimi amplitüdünü artirdigi, hücre içi serbest $Ca^{2+}$ miktarindaki artisin ise YVKK akimi amplitüdünü düsürdügü tespit edildi.