Dergiler / Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi / 1995 / Cilt: 8 - Sayı: 1
Marek Hastalığına Karşı Cell-Associated Aşı Üretimi Üzerine Araştırmalar
- Sayfa
- 100–126
- DOI
- —
Özet
Bu araştırmada CEF-Chicken Embryo Fibroblast doku kültürü hücrelerinde cell-associated SB-1 ve HTV, FC-126 Marek aşı suşları ile aşı üretilip, kanatlıların bu hastalığına karşı koruyucu olarak kullanılması amaçlanmıştır . CEF hücreleri standart metodla ra göre 10-11 günlük SPF civciv embriyolarından hazırlandı. Hücreler %4 yeni doğmuş buzağı serumu, %10 TPB, antibiyotik ve antimiketik ilaveli MEM mediumda üretildi. Manolayer kültürler 24-48 saat rolling şişelerde in ku be edildi, daha sonra bu 1°CEF hücrelerin ikinci pasajı yapıldı , (2°CEF). Bu pasajın sonunda meydana gelen manolayer kültürlerde SB-1 veya FC-126 Marek aşı suşlarından biri tarafından enfekte edilip hücrelertekrar 1°CEF'te olduğu gibi tamamen sitopatik efekt görülene kadar rolling inkubatörde (yaklaşık 48 saat) inkübe edildi. Virus tarafından CPE-Cytopathic Effect tamamen meydana getirildikten sonra doku kültürü mediumu atılıp , hücreler usulüne uygun olarak toplandı, toplanan hücreler MEM ile %15 oranında hazırlanmış DMSO-Dimethyl sulphoxide içine alınıp sayıldı , her ml' de 2x1 07 hücre olacak şekilde aynı solüsyonla süspansiyon yapılıp ampullere konan aşılar -196°C'de sıvı nitrojen içinde saklanmakta ve sevk edilmektedir. Her üretilen rekoltun sonunda virusun titresi tayin edilir ve sterilite testleride yapılır
Abstract
The study on cell associated vaccine production against to Marek's disease. In this research; Vaccine production against to MAREK disease had been aimed by the serotype-2 SB-1 and serotype-3 THV, FC-126 Marek cell-associated vaccine strains. Primary chicken embryo fibrablast tissue culture cellsCEF is prepared from SPF eggs fumigated upon receipt at the laboratary and incubated to 10-11 days by the standart method. The CEF is grown in Eagle's minimum essential medium-MEM which is supplemented with 4% sterile new born calf sera, 10% TPB, antibiotics and antimycotic. They are incubated at 37°C in rolling cultura system until the complete manolayer is developed. The complete manolayer is infected with serotype-2 SB-1 or serotype-3 THV, FC- 126 Marek vaccine strains. CEF are incubated about 48 hours until diffuse cytopathic effect-CPE develop. After second passage is done in the same position. When the 15% DMSO-Dimethyl sulphoxide is added as a preservative and they are distributed to ampules. Cells are frozen and stored in -196°C liquid nitrogen. After a sample of the vaccnie is tested for sterility and virus content.