Dergiler / Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi / 2003 / Cilt: 50 - Sayı: 1

Dondurulmuş boğa spermasının değişik kapasitör maddelerle in vitro kapasitasyonu

In vitro capacitation of frozen-thawed bull semen by different capacitating agents

Sayfa
39–46
Yayın Tarihi
2022-10-12
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Buna göre, her üç grupta elde edilen en yüksek kapasitasyona uğramış spermatozoon oranları l. grupta (100 Hg/ml heparinle 60 dakika inkübasyon) %25.466, 2. grupta (15 mM kafein+25 $mu$g/ml heparin) %28.440 ve 3. grupta (10 m M kafein+0,3 $mu$M kalsiyum ionofor) %29.908 olarak bulundu, ilk grupta kullanılan heparin konsantrasyonunun ve artan inkübasyon süresinin kapasite olmuş spermatozoon oranlarını arttırdığı gözlendi, ikinci ve üçüncü gruplarda ise kullanılan kapasitör maddelerin birbirlerinin etkilerini destekledikleri ve toplam konsantrasyonlarının artmasına bağlı olarak kapasite olmuş spermatozoon oranlarının yükseldiği belirlendi.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Çalışmada, heparin (1. grup), heparin+kafein (2. grup) ve kafein+kalsiyum ionoforun (3. grup) in vitro spermatozoon kapasitasyonu üzerine etkileri incelendi.
📊
Temel Bulgular & Veri:Bu amaçla sperma 1. grupta 10, 25 ve 100 $mu$g/ml heparin ile 5, 15 ve 60 dakikalık süreler için ihkübasyona bırakılırken 2. grupta 5, 1O, 15 mM kafein, O, 5, 10, 25 $mu$g/ml heparin ile ve 3. grupta O, 5, 10 mM kafein, 0.1, 0.2, 0.3 $mu$M kalsiyum iyonofor ile kombine edilerek kullanıldı.
💡
Sonuç & Katkı:Buna göre, her üç grupta elde edilen en yüksek kapasitasyona uğramış spermatozoon oranları l. grupta (100 Hg/ml heparinle 60 dakika inkübasyon) %25.466, 2. grupta (15 mM kafein+25 $mu$g/ml heparin) %28.440 ve 3. grupta (10 m M kafein+0,3 $mu$M kalsiyum ionofor) %29.908 olarak bulundu, ilk grupta kullanılan heparin konsantrasyonunun ve artan inkübasyon süresinin kapasite olmuş spermatozoon oranlarını arttırdığı gözlendi, ikinci ve üçüncü gruplarda ise kullanılan kapasitör maddelerin birbirlerinin etkilerini destekledikleri ve toplam konsantrasyonlarının artmasına bağlı olarak kapasite olmuş spermatozoon oranlarının yükseldiği belirlendi.
🔬Tür:Laboratuvar & Saha Deneyi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Alan Parametreleri

Özet

Çalışmada, heparin (1. grup), heparin+kafein (2. grup) ve kafein+kalsiyum ionoforun (3. grup) in vitro spermatozoon kapasitasyonu üzerine etkileri incelendi. Bu amaçla sperma 1. grupta 10, 25 ve 100 $mu$g/ml heparin ile 5, 15 ve 60 dakikalık süreler için ihkübasyona bırakılırken 2. grupta 5, 1O, 15 mM kafein, O, 5, 10, 25 $mu$g/ml heparin ile ve 3. grupta O, 5, 10 mM kafein, 0.1, 0.2, 0.3 $mu$M kalsiyum iyonofor ile kombine edilerek kullanıldı. Kapasitasyonun sağlanmasından sonra spermaya 100 $mu$/ml lizofosfatidilkolin (LPC) ilave edilerek akrozom reaksiyonu (AR) indüklendi. Oluşan reaksiyonun ve spermatozoonlarin canlılıklarının belirlenebilmesi için trypan blue ve Giemsa ile ikili boyama yapıldı. Bu boyama ile spermatozoonların canlılıkları ve reaksiyona girmeleri gruplandırılarak değerlendirildi. Gruplar: l- Canlı, reaksiyon (-); 2- Ölü, reaksiyon (-); 3- Canlı, reaksiyon (+); 4- Ölü, reaksiyon (+) olarak adlandırıldılar. Buna göre, her üç grupta elde edilen en yüksek kapasitasyona uğramış spermatozoon oranları l. grupta (100 Hg/ml heparinle 60 dakika inkübasyon) %25.466, 2. grupta (15 mM kafein+25 $mu$g/ml heparin) %28.440 ve 3. grupta (10 m M kafein+0,3 $mu$M kalsiyum ionofor) %29.908 olarak bulundu, ilk grupta kullanılan heparin konsantrasyonunun ve artan inkübasyon süresinin kapasite olmuş spermatozoon oranlarını arttırdığı gözlendi, ikinci ve üçüncü gruplarda ise kullanılan kapasitör maddelerin birbirlerinin etkilerini destekledikleri ve toplam konsantrasyonlarının artmasına bağlı olarak kapasite olmuş spermatozoon oranlarının yükseldiği belirlendi.

Abstract

In this study, the effects of heparin (1st group), caffein plus heparin (2nd group) and caffein plus calcium ionophore (3rd group) on in vitro capacitation of frozen-thawed bull semen were investigated. For this purpose, in the first group, three dosages of heparin (10, 25, 100 |-ig/ml) and three incubation time (5, 15, 60 min.) were examined. In the second group, 5, 10 and 15 inM concentrations of caffein combined with 0, 5, 10, 25 $mu$g/ml heparin and in the third group, 0, 5, 10 mM concentrations of caffein combined with 0.1, 0.2, 0.3 $mu$M calcium ionophore. After induction of capacitation by these agents, a dose of 100 mg/ml lysophosphatidylcholine (LPC) was added to medium to induce acrosome reaction for a period of 15 minutes. To determine the reaction and viability, spermatozoa were stained by dual staining method using trypan blue and Giemsa. Four categories of spermatozoa were identified and counted: 1- Intact acrosome, live; 2- Intact acrosome, dead; 3- Detached acrosome, live; 4- Detached acrosome, dead. In the first, second and third groups the highest results were 25.466% (100 fig/ml heparin, 60 min.), 28.440% (15 mM caffein plus 25 $mu$/ml heparin) and 29.908% (10 mM caffein plus 0,3 $mu$M calcium ionophore), respectively. The mean proportions of capacitated spermatozoa increased as the heparin dosage and incubation period increased in the first group. A synergistic effect of caffein plus heparin and caffein plus calcium ionophore were observed in our study. The total dosages of capacitating agents increased, mean proportions of capacitated spermatozoa increased in the second arid third groups.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

TEKİN, N., SERİN, İ. (2022). Dondurulmuş boğa spermasının değişik kapasitör maddelerle in vitro kapasitasyonu. Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, Cilt: 50 - Sayı: 1, 39–46. https://ajindex.com/articles/445290

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (1)

  1. Aalseth EP, Saacke RG (1986): Vital staining and acrosomal evaluation of bovine sperm. Gamete Res, 15, 73-81. 2.Aoyagi Y, Fujii K, Iwazumi Y, Furudate M, Fukui Y, Ono H (1988): Effects of two treatments on semen from dif­ferent bulls on in vitro fertilization results of bovine oocy-tes. Theriogenology, 30, 973-985. 3.Bellin ME, Hawkins HE, Oyarzo JN, Vanderboom RJ, Ax RL (1996): Monoclonal antibody detection of he par inbinding proteins on sperm corresponds to increased fer­tility of bulls. J Anim Sci, 74, 173-182. 4.Blottner S, Nehring H, Torner H (1990): Individual dif­ ferences in capacitation of bull spermatozoa by heparin in vitro: Relationship to fertility. Theriogenology, 34, 619-628. 5.Calvete JJ, Dostâlovâ Z, Sanz L, Aderman K, Hole HH, Töpfer-Petersen E (1996): Mapping the heparin-binding domain of boar spermadheins. FEBS Letters, 379, 207-211. 6.Cao X, Ben K, Wang Y, Wang Y (1997): Effects of yaminobutyric acid, progesterone and ionophore A23187 on acrosome reaction of tree shrew sperm in vitro: Exa­mination of acrosome reaction with an improved flo­ rescence microscopy. Anim Reprod Sci, 49, 225-234. 7.Cross LN, Meizel S (1989): Methods for evaluating the acrosomal status of mamalian sperm. Biol Reprod, 41,.635-641. 8.Didion BA, Graves CN (1986): In vivo capacitation and acrosome reaction of bovine sperm in estrous and diestrous cows. J Anim Sci, 62, 1029-1033: 9.Ellington JE, Ball BA, Blue BJ, Wilker CE (1993): Capacitation-like membrane changes and prolonged viability in vitro of equine spermatozoa cultured with uterine tube epithelial cells. Am J Vet Res, 54, 1505-1510. 10.Fukui Y (1990): Effect of follicle cells on the acrosome re­ action, fertilization and devolepmental competence of bo­ vine oocytes matured in vitro. Mol Reprod Dev, 26, 40-46. 11.Fukui Y, Sonoyama T, Mochizuki H, Ono H (1990): Ef­ fects of heparin dosage and sperm capacitation time on in vitro fertilization and cleavage of bovine oocytes matured in vitro. Theriogenology, 34, 579-591. 12.Gordon I (1994): Laboratoij Production of Cattle Emb­ ryos. 143-169. In: GJ Persley (Ed), Capacitating Sperm. Cab International, Wallingford. 13.Graham JK, Foote RH, Parrish JJ (1986): Effect of dilauroylphosphatidylcholine on the acrosome reaction and subsequent penetration of bull spermatozoa into zona-free hamster egg. Biol Reprod, 35, 413-424. 14.Handrow RR, First NL, Parrish JJ (1989): Calcium re­quirement and increased association with bovine sperm du­ring capacitation by heparin.