KaydedilenlerDerginizi ekleyin

Dergiler / Harran Tarım ve Gıda Bilimleri Dergisi / 2018 / Cilt: 22 - Sayı: 2

Farklı pH ve sıcaklık değerlerinin Pichia pastoris'de rekombinant ekspanzin üretimi üzerine etkisi

Effect of different pH and temperature on the production of recombinant expansin in Pichia pastoris

Merve AYTEKİN AKBABA
Asliye KARAASLAN
Selin ALİHANOĞLU
Hasan VARDİN
Mehmet KARAASLAN
Sayfa
207–214
Yayın Tarihi
2018-06-25
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Deneysel sonuçlara göre maksimum rekombinant ekspanzin üretimi için P. pastoris mayalarının optimum fermantasyon koşulları 25oC sıcaklık ve pH 7.0 olarak tespit edilmiştir.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Bu çalışma kapsamında rekombinant Ekspanzin üretimi amacıyla domatesten izole edilen LeExp1 geni Pichia pastoris mayalarına pPIC9K vektörü vasıtasıyla aktarılmıştır.
📊
Temel Bulgular & Veri:Ekspresyon koşulları 20, 25, 30°C ve pH 4.0, 5.0, 6.0 ve 7.0 değerleri için ayrı ayrı sağlanmıştır.
💡
Sonuç & Katkı:Deneysel sonuçlara göre maksimum rekombinant ekspanzin üretimi için P. pastoris mayalarının optimum fermantasyon koşulları 25oC sıcaklık ve pH 7.0 olarak tespit edilmiştir.
🔬Tür:Deneysel Tarla Denemesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Ekspanzin · Pichia pastoris · Rekombinant protein

Özet

Bu çalışma kapsamında rekombinant Ekspanzin üretimi amacıyla domatesten izole edilen LeExp1 geni Pichia pastoris mayalarına pPIC9K vektörü vasıtasıyla aktarılmıştır. Ekspresyon koşulları 20, 25, 30°C ve pH 4.0, 5.0, 6.0 ve 7.0 değerleri için ayrı ayrı sağlanmıştır. Fermentasyon özütlerinin Biomass analizi ve Bradford assay deneyleri sonucunda toplam rekombinant protein miktarları ve toplam hücre konsantrasyonları belirlenmiştir. Farklı pH ve sıcaklık değerlerinin rekombinant protein üretim miktarına ve toplam hücre konsantrasyonuna olan etkileri incelenmiştir. Deneysel sonuçlara göre maksimum rekombinant ekspanzin üretimi için P. pastoris mayalarının optimum fermantasyon koşulları 25oC sıcaklık ve pH 7.0 olarak tespit edilmiştir.

Abstract

In this study LeExp1 gene isolated from tomato genome was transferred to Pichia pastoris by using pPIC9K vector for production of recombinant Expansin protein. Recombinant protein expression was carried out at 20, 25, 30°C temperature and 4.0, 5.0, 6.0 and 7.0 pH levels. Total protein and dry cell weight amounts was determined in fermentation medium. The effects of different fermentation temperature and pH level in the medium on protein expression and total cell concentration were investigated. The optimum fermentation conditions for P. pastoris were determined as 25oC and pH 7.0 according to experimental results.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

AKBABA, M. A., KARAASLAN, A., ALİHANOĞLU, S., VARDİN, H., KARAASLAN, M. (2018). Farklı pH ve sıcaklık değerlerinin Pichia pastoris'de rekombinant ekspanzin üretimi üzerine etkisi. Harran Tarım ve Gıda Bilimleri Dergisi, Cilt: 22 - Sayı: 2, 207–214. https://ajindex.com/articles/423398

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (10)

  1. Ahmad, M., Hirz, M., Pichler, H., Schwab, H., 2014. Protein expression in Pichia pastoris: Recent achievements and perspectives for heterologous protein production. Applied Microbiology and Biotechnology., 98: (12),5301-5317. Bayraktar E., 2009. Effects of pH on human growth hormone production by Pichia pastoris considering the expression levels of regulatory genes, Master Thesis. Bradford, M.M., 1976. Rapid and sensitive method for the quantitation of micro-gram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye bindin g, Analy- tical biochemistry, 72(1-2), 248-254.
  2. Calık P, Bayraktar E, Inankur B, Soyaslan ES, Sahin M, Taspınar H, Acık E, Yılmaz R ve Ozdamar TH, 2010. Influence of pH on recombinant human growth hormone production by Pichia pastoris; Journal of Chemical Technology and Biotechnology, 85(12), 1628-1635
  3. Cereghino, J.L., Cregg, J.M., 2000. Heterologous protein expression in the methylotrophicyeast Pichia pastoris. FEMS Microbiology Reviews,. 24(1), 45-66.
  4. Cereghino, G.P.L., Sunga, A.J., Cereghino, J.L., Cregg, J.M., 2001. Expression of foreign genes in the yeast Pichia pastoris, Genetic Enginering, 23:157–169.
  5. Cosgrove, D.J., 2000. Loosening of plant cell walls by expansins. Nature 407:321–326. Chang S,W, Shieh C,J, Lee G,C, Akoh C, C, Shaw J, F, 2006. Optimized Growth Kinetics of Pichia pastoris and Recombinant Candida rugosa LIP1 Production by RSM. Journal of Molecular Microbiology and Biotechnology, 11(1-2), 28-40.
  6. Cosgrove, D. J., 2005. Growth of the plant cell wall. Nature Review Molecular & Cell Biology, 6(11), 850. Cregg, J.M., Vedvick, T.S., Raschke,W.C, 1993. Recent advances in the expression of foreign genes in Pichia pastoris, BioTechnology 11: 905 – 910. Cregg, J.M., Cereghino, J.L., Shi, J., Higgins, D.R., 2000. Recombinant protein expression in Pichia pastoris. Molecular Biotechnology,. 16(1), 23-52.
  7. Dehnavi, E., ve ark., 2016. Cloning and highlevel expression of β-xylosidase from Seleno-monas ruminantium in Pichia pastoris by optimizing of pH, methanol concentration and temperature conditions. Protein Expression and Purification, 124, 55-61.
  8. Dale F, C. Robert, W. Tracy, 2010. Optimization of the expression of recombinant human Activin A in the yeast Pichia pastoris; Biotechnology Progress, 26(2), 372-383.
  9. Files D, Ogawa M, Scaman CH, Baldwin SA, 2001. A Pichia pastoris fermentation process for producing high- levels of recombinant human cystatin-C. Enzyma and Microbiol Technology, 29(6-7), 335-340.
  10. Goodrick, J.C., Ku