KaydedilenlerDerginizi ekleyin

Dergiler / Türkiye Diyabet ve Obezite Dergisi / 2026 / Cilt: 8 Sayı: 1

Obezite Araştırmaları İçin İn Vitro Adiposit Hücre Kültürü İle Etkili Model Oluşturma: Ön Çalışma

Creating An Effective Model with In Vitro Adipocyte Cell Culture for Obesity Research: Preliminary Study

Ezgi Nur Çil(DOKUZ EYLÜL ÜNİVERSİTESİ, SAĞLIK BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ)0000-0002-2960-9616
Yasemin Soysal(DOKUZ EYLUL UNIVERSITY)0000-0003-1580-0564
Sayfa
59–64
Yayın Tarihi
2024-04-29
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Bulgular: Deney sonuçları, 0,5 mM IBMX, 0,25 μM DEX ve 1 μg/mL insülin içeren adipogenik kokteylin 3T3-L1 hücre farklılaşması için en etkili kokteyl olduğunu (p<0,0001) ve farklılaşmanın etkinliğinin adipojenik ajanların konsantrasyonları ile yakından ilişkili olduğunu göstermiştir.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Amaç: 3T3-L1 preadipositlerin farklılaşma etkinliği obezite, diyabet ve ilgili bozukluklarla ilişkili hücresel mekanizmalar üzerine yapılan çalışmaları etkileyen önemli bir faktördür. 3T3-L1 hücrelerinin farklılaşması genellikle insülin, deksametazon (DEX) ve 3-izobütil- 1-metilksantin (IBMX) içeren bir adipojenik kokteyl ile indüklenmektedir. 3T3-L1 hücreleri çoğaltılırken dikkat edilmesi gereken önemli noktalar içeren bir sürece sahip hassas bir hücre grubu olup ilerleyen pasajlarda farklılaşma yeteneğini kaybedebilmektedir.
📊
Temel Bulgular & Veri:Bu sorunu çözmek için, çalışmamızın amacı doğrultusunda, yaygın olarak kullanılan üç farklı adipojenik kokteylin farklılaşma verimliliği karşılaştırılmıştır.
💡
Sonuç & Katkı:Bulgular: Deney sonuçları, 0,5 mM IBMX, 0,25 μM DEX ve 1 μg/mL insülin içeren adipogenik kokteylin 3T3-L1 hücre farklılaşması için en etkili kokteyl olduğunu (p<0,0001) ve farklılaşmanın etkinliğinin adipojenik ajanların konsantrasyonları ile yakından ilişkili olduğunu göstermiştir.
🔬Tür:Modelleme & Sayısal Simülasyon
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Obezite · hücre kültürü · 3T3-L1

Özet

Amaç: 3T3-L1 preadipositlerin farklılaşma etkinliği obezite, diyabet ve ilgili bozukluklarla ilişkili hücresel mekanizmalar üzerine yapılan çalışmaları etkileyen önemli bir faktördür. 3T3-L1 hücrelerinin farklılaşması genellikle insülin, deksametazon (DEX) ve 3-izobütil- 1-metilksantin (IBMX) içeren bir adipojenik kokteyl ile indüklenmektedir. 3T3-L1 hücreleri çoğaltılırken dikkat edilmesi gereken önemli noktalar içeren bir sürece sahip hassas bir hücre grubu olup ilerleyen pasajlarda farklılaşma yeteneğini kaybedebilmektedir. Bu sorunu çözmek için, çalışmamızın amacı doğrultusunda, yaygın olarak kullanılan üç farklı adipojenik kokteylin farklılaşma verimliliği karşılaştırılmıştır. Bununla birlikte, birtakım parametreler değiştirilerek 3T3-L1 hücrelerinin farklılaşma yetenekleri test edilmiştir. Gereç ve Yöntemler: Çalışmamızda 3T3-L1 hücre kültürü, fibroblast hücrelerin olgun adiposit hücrelere farklılaştırılması, Oil Red O boyama ile lipitlerin mikroskop altında gösterilmesi ve kantitatif analiz için boyanın spektrofotometrik ölçümü yöntemleri kullanılmıştır. Bulgular: Deney sonuçları, 0,5 mM IBMX, 0,25 μM DEX ve 1 μg/mL insülin içeren adipogenik kokteylin 3T3-L1 hücre farklılaşması için en etkili kokteyl olduğunu (p<0,0001) ve farklılaşmanın etkinliğinin adipojenik ajanların konsantrasyonları ile yakından ilişkili olduğunu göstermiştir. Sonuç: Çalışmamızda ATCC’nin 3T3-L1 hücreleri için vermiş olduğu protokolün alternatifi olarak in vitro preklinik obezite modeli için kullanılabilecek önemli modifikasyonlar bildirilmiştir.

Abstract

Aim: The differentiation efficiency of 3T3-L1 preadipocytes is a crucial factor affecting studies on cellular mechanisms associated with obesity, diabetes and related disorders. Differentiation of 3T3-L1 cells is usually induced by an Adipogenic cocktail containing insulin, dexamethasone (DEX), and 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX). There is a process that includes important points to consider when growing 3T3-L1 cells. It is a sensitive cell group and may löse its ability to differentiate in later passages. To solve this problem, for the purpose of our study, the differentiation efficiency of three different commonly used Adipogenic cocktails was compared. Additionally, the differentiation abilities of 3T3-L1 cells were tested by changing some parameters. Material and Methods: In our study, 3T3-L1 cell culture, differentiation of fibroblast cells into mature adipocyte cells, demonstration of lipids under the microscope with Oil Red O staining, and spectrophotometric measurement of the dye for quantitative analysis were used. Results: Experimental results Showed that the Adipogenic cocktail containing 0.5 mM IBMX, 0.25 μM DEX and 1 μg/mL insülin was the most effective cocktail for 3T3-L1 cell differentiation (p<0.0001) and the effectiveness of differentiation was closely related to the concentrations of adipogenic agents. Conclusion: In our study, important modifications that can be used for the in vitro preclinical obesity model have been reported as an alternative to the protocol given by ATCC for 3T3-L1 cells.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

Çil, E. N., Soysal, Y. (2024). Obezite Araştırmaları İçin İn Vitro Adiposit Hücre Kültürü İle Etkili Model Oluşturma: Ön Çalışma. Türkiye Diyabet ve Obezite Dergisi, Cilt: 8 Sayı: 1, 59–64. https://doi.org/10.25048/tudod.1418459

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (20)

  1. Torres-Carot V, Suárez-González A, Lobato-Foulques C. The energy balance hypothesis of obesity: do thelaws of thermodynamics explain excessive adiposity? Eur J Clin Nutr. 2022;76(10):1374-1379.
  2. Başkent H, Çin NNA, Bayraktaroğlu T, Barut F. Obezite Yönetiminde Adipoz Doku Kahverengileşmesi. Türkiye Diyabet ve Obezite Dergisi. 2023;7(1):81-91.
  3. Ghaben AL, Scherer PE. Adipogenesis and metabolic health. Nat Rev Mol Cell Biol. 2019;20(4):242-258.
  4. Meldrum DR, Morris MA, Gambone JC. Obesity pandemic: causes, consequences, and solutions-but do we have the will?. Fertil Steril. 2017;107(4):833-839.
  5. Derosa G, Maffioli P. Anti-obesity drugs: a review about their effects and their safety. Expert Opin Drug Saf. 2012;11(3):459- 471.
  6. Ahima RS, Lazar MA. Physiology. Thehealth risk of obesity— better metrics imperative. Science. 2013;341(6148):856-858.
  7. Bak EJ, Park HG, Kim JM, Kim JM, Yoo YJ, Cha JH. Inhibitory effect of evodiamine alone and in combination with rosiglitazone on in vitro adipocyte differentiation and in vivo obesity related to diabetes. Int J Obes (Lond). 2010;34(2):250-260.
  8. Khalilpourfarshbafi M, Gholami K, Murugan DD, Abdul Sattar MZ, Abdullah NA. Differentialeffects of dietaryflavonoids on adipogenesis. Eur J Nutr. 2019;58(1):5-25.
  9. Armani A, Mammi C, Marzolla V, Calanchini M, Antelmi A, Rosano GM, Fabbri A, Caprio M. Cellular models for understanding adipogenesis, adipose dysfunction, and obesity. J Cell Biochem. 2010;110(3):564-572.
  10. Zhao X, Hu H, Wang C, Bai L, Wang Y, Wang W, Wang J. A comparison of methods for effective differentiation of the frozen- thawed 3T3-L1 cells. Anal Biochem. 2019;568:57-64.
  11. Gregoire FM. Adipocyte differentiation: from fibroblast to endocrine cell. Exp Biol Med (Maywood). 2001;226(11):997- 1002.
  12. Legeza B, Balázs Z, Odermatt A. Fructose promotes the differentiation of 3T3-L1 adipocytes and accelerates lipid metabolism. FEBS Lett. 2014;588(3):490-496.
  13. Melo RC, D’Ávila H, Bozza PT, Weller PF. Imaging lipid bodies within leukocytes with different light microscopy techniques. Methods Mol Biol. 2011;689:149-161.
  14. Kraus NA, Ehebauer F, Zapp B, Rudolphi B, Kraus BJ, Kraus D. Quantitative assessment of adipocyte differentiation in cell culture. Adipocyte. 2016;5(4):351-358.
  15. Poulos SP, Dodson MV, Hausman GJ. Cell line models for differentiation: preadipocytes and adipocytes. Exp Biol Med (Maywood). 2010;235(10):1185-1193.
  16. Hua Y, Ke S, Wang Y, Irwin DM, Zhang S, Wang Z. Prolonged treatment with 3-isobutyl-1-methylxanthine improves the efficiency of differentiating 3T3-L1 cells into adipocytes. Anal Biochem. 2016;507:18-20.
  17. Liu X, Liu XN, Li TJ, Liu B. Research Progress of the Differentiation of 3T3-L1 Preadipocytes into Mature Adipocytes. Zhongguo Yi Xue Ke Xue Yuan Xue Bao. 2017;39(5):727-731.
  18. Zebisch K, Voigt V, Wabitsch M, Brandsch M. Protocol for effective differentiation of 3T3-L1 cells to adipocytes. Anal Biochem. 2012;425(1):88-90.
  19. Sakoda H, Ogihara T, Anai M, Funaki M, Inukai K, Katagiri H, Fukushima Y, Onishi Y, Ono H, Fujishiro M, Kikuchi M, Oka Y, Asano T. Dexamethasone-induced insulin resistance in 3T3-L1 adipocytes is due to inhibition of glucose transport rather than insulin signal transduction. Diabetes. 2000;49(10):1700-1708.
  20. Mehra A, Macdonald I, Pillay TS. Variability in 3T3-L1 adipocyte differentiation depending on cell culture dish. Anal Biochem. 2007;362(2):281-283.