Dergiler / Mediterranean Agricultural Sciences / 2018 / Cilt: 31 - Sayı: 1

Yüksek oleik tip ayçiçeğinin güvenilir moleküler seçiminde yeni tasarlanmış primerler ile optimize PCR protokolü

An optimized PCR protocol with newly designed primers for reliable molecular selection of high oleic type sunflower

Sayfa
55–60
Yayın Tarihi
2018-04-01
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

İlave bölgeye yönelik mevcut PCR protokolleri ile başarılı sonuçlar elde edemediğimiz için, bu çalışmada yetiştiricilere/ıslahçılara para ve zamandan tasarruf etmek gibi avantajlar sunan, yüksek ve düşük oleik tip ayçiçeği genotiplerinin tek bir PCR tüpünde güvenilir şekilde ayrımını sağlayan, yeni primer çiftlerinin kullanıldığı yeni bir multipleks PCR protokolü bildirilmektedir.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Yüksek oleik tip ayçiçeği, işlenme sürecindeki kararlı yapısı ve sağlık açısından istenen özelliklere sahip olması nedeniyle en önemli yağ bitkilerinden birisidir.
📊
Temel Bulgular & Veri:Bu çalışma ile ayrıca, kontrol olarak FAD2 geninin normal dizisini ve Pervenets mutasyonuyla yakından ilişkili olduğu bilinen ilave DNA dizilerinin doğrudan analizini hedefleyen yeni tasarladığımız primerler ile optimize ettiğimiz yeni bir PCR protokolü tanımlanmıştır.
💡
Sonuç & Katkı:İlave bölgeye yönelik mevcut PCR protokolleri ile başarılı sonuçlar elde edemediğimiz için, bu çalışmada yetiştiricilere/ıslahçılara para ve zamandan tasarruf etmek gibi avantajlar sunan, yüksek ve düşük oleik tip ayçiçeği genotiplerinin tek bir PCR tüpünde güvenilir şekilde ayrımını sağlayan, yeni primer çiftlerinin kullanıldığı yeni bir multipleks PCR protokolü bildirilmektedir.
🔬Tür:Araştırma Makalesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Helianthus annuus L. · Markıra dayalı seleksiyon · Oleik asit

Özet

Yüksek oleik tip ayçiçeği, işlenme sürecindeki kararlı yapısı ve sağlık açısından istenen özelliklere sahip olması nedeniyle en önemli yağ bitkilerinden birisidir. Yüksek oleik içeriğine sahip ayçiçeğinin gaz kromatografisi gibi standart metotlarla tayini zaman alıcı ve pahalıdır. Diğer yandan, yüksek oleik asit özelliği ile ilişkili moleküler belirteçlerle yapılan seleksiyon ayçiçeği yetiştiriciliğini kolaylaştırmak açısından kullanışlı ve güçlü bir araçtır. Bu çalışmada, yüksek oleik tip ayçiçeği çeşitlerinin seçiminde kullanılan üç moleküler belirteç karşılaştırılmıştır. Bu çalışma ile ayrıca, kontrol olarak FAD2 geninin normal dizisini ve Pervenets mutasyonuyla yakından ilişkili olduğu bilinen ilave DNA dizilerinin doğrudan analizini hedefleyen yeni tasarladığımız primerler ile optimize ettiğimiz yeni bir PCR protokolü tanımlanmıştır. Çalışmamızın sonuçlarına göre, yüksek oleik tip ayçiçeği çeşitlerinin seçiminde Pervenets mutasyonuyla yakın ilişkili olan ilave bölgeyi özgün PCR protokolleri ile göstermek SSR belirtecinden daha güvenilirdir. İlave bölgeye yönelik mevcut PCR protokolleri ile başarılı sonuçlar elde edemediğimiz için, bu çalışmada yetiştiricilere/ıslahçılara para ve zamandan tasarruf etmek gibi avantajlar sunan, yüksek ve düşük oleik tip ayçiçeği genotiplerinin tek bir PCR tüpünde güvenilir şekilde ayrımını sağlayan, yeni primer çiftlerinin kullanıldığı yeni bir multipleks PCR protokolü bildirilmektedir.

Abstract

High oleic sunflower is one of the most significant oilseed crops due to the stability of its oil in processing and desirable characteristics for health. Determination of high oleic sunflower by standard methods such as gas chromatography is time consuming and expensive. On the other hand, marker-assisted selection analysis with molecular markers associated with high oleic acid trait is a useful and powerful tool in order to facilitate sunflower breeding programs. In this study, we compared three molecular markers which have been used for selection of the high oleic sunflower varieties. We also describe an optimized PCR protocol with newly designed two primer pairs targeting normal sequence of FAD2 gene as internal control and direct analysis of the inserted DNA sequences which is known to be closely linked to the Pervenets mutation. According to results of our study, showing the insertion site which is linked to the Pervenets mutation by the insertion specific PCR protocols is more reliable than the SSR marker for selection of the high oleic sunflower varieties. Because we have not been able to get successful results with the available PCR protocols described for the insertion site, we report here a novel multiplex PCR protocol with newly designed primers enabling reliable discrimination of the high oleic and low oleic sunflower genotypes in a single PCR tube, which offers some advantages to the breeders by means of saving money and time.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

BİLGEN, B. B. (2018). Yüksek oleik tip ayçiçeğinin güvenilir moleküler seçiminde yeni tasarlanmış primerler ile optimize PCR protokolü. Mediterranean Agricultural Sciences, Cilt: 31 - Sayı: 1, 55–60. https://ajindex.com/articles/123113

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (10)

  1. Alberio C, Izquierdo NG, Galella T, Zuil S, Reid R, Zambelli A, Aguirrezabal LA (2016) A new sunflower high oleic mutation confers stable oil grain fatty acid composition across environments. European Journal of Agronomy 73: 25-33.
  2. Baydar H, Erbas S (2005) Influence of seed development and seed position on oil, fatty acids and total tacopherol contents in sunflower (Helianthus annuus L.). Turkish Journal of Agriculture and Forestry 29: 179-186.
  3. Berville A, Lacombe S, Veillet S, Granier C, Leger S, Jouve P (2009) Method of selecting sunflower genotypes with high oleic acid content in seed oil, The Patent Cooperation Treaty (PCT), WO 2005/106022 A2. Bilgen BB (2016) Characterization of sunflower inbred lines with high oleic acid content by DNA markers. In Kaya Y and Hasancebi S (Eds) Proceedings of the 19th international sunflower conference. ISA, Edirne, Turkey, pp. 662-668.
  4. Broun P, Gettner S, Somerville C (1999) Genetic engineering of plant lipids. Annual Review of Nutrition 19: 197-216.
  5. CETIOM (2002). Technical Center for Oilseed Crops and Industrial Hemp. Cvejic S, Jocic S, Dimitrijevic A, Imerovski I, Miladinovic D, Jockovic M, Miklic V (2016) An EMS mutation altering oil quality in sunflower inbred line. In Kaya Y and Hasancebi S (Eds) Proceedings of the 19th international sunflower conference. ISA, Edirne, Turkey, pp. 422-430.
  6. Dehmer KJ, Friedt W (1998) Development of molecular markers for high oleic acid content in sunflower (Helianthus annuus L.). Industrial Crops and Products 7: 311-315.
  7. Delplanque B, Le Roy B, Senault C, Lemort N (1997) Reduced capacity of cholesterol efflux, delayed postprandial lipid response, and abnormal Apo-CIII distribution in normolipemic sujects with premature coronary heart disease. Atherosclerosis 134(1,2): 338-4, pp. 200. Demurin Y and Borisenko O (2011) Genetic collection of oleic acid content in sunflower seed oil. Helia 34: 69-74.
  8. Dimitrijevic A, Imerovski I, Dragana M, Cvejic S, Jocic S, Zeremski T, Sakac Z (2017) Oleic acid variation and marker-assisted detection of Pervenets mutation in high- and low-oleic sunflower cross. Crop Breeding and Applied Biotechnology 17: 235-241.
  9. Evci G, Pekcan V, Yilmaz MI, Cıtak N, Tuna N, Ay O, Pilaslı A, Kaya Y (2016) Determination of yield performances of oleic type sunflower (Helianthus annuus L.) hybrids resistant to broomrape and downy mildew. Ekin Journal of Crop Breeding and Genetics 2(1): 45-50.
  10. Fernandez Martinez JM, Perez Vich B and Velasco L (2009) Sunflower. In: Oil Cro