Quantitative determination of vitamin B2 by HPLC in enteral nutritional products

Abstract

Objective: The aim of this study is to determine the applicability of fluorescence detection (FL/250-546 nm) method by the simply, specific and sensitive high pressure liquid chromatography (HPLC) for quantitative estimation of vitamin B2 (riboflavin) levels in enteral nutritional products.Method: HPLC method was used for quantitative determination of vitamin B2 in total 48 enteral nutritional products. The chromatographic system was done on a C18 column (250x4,60-5micron) with fluorescence detection at 250-546 nm. Buffer containing hexanesulphonic acid sodium salt and methanol (75:25) was used as the mobile phase at a flow rate of 1 ml/min. The results were evaluated using the paired samples test. Results: The retention time of vitamin B2 was determined as ca. 14 min. The concentration of vitamin B2 of enteral nutritional products ranged from 0.11 to 0.40 mg/100 ml. The determined values showed similarity with the labelling values of the products. Conclusion: It was showed that HPLC-FL (HPLC-Fluorescence Detector) can be applied for the quantitative determination of vitamin B2 levels in enteral nutritional products. This had the advantages of improved simplicity, sensitivity and shorter application times.

Özet

Amaç: Enteral beslenme ürünlerindeki vitamin B2 (riboflavin) miktarının tayinine yönelik floresans dedeksiyonu (FL/250-546 nm) ile kolay, spesifik ve duyarlı, yüksek basınçlı sıvı kromatografi (HPLC) yönteminin uygulanabilirliğini tespit etmektir. Yöntem: Toplam 48 adet enteral beslenme ürününün vitamin B2 miktarlarının belirlenmesi için HPLC yöntemi kullanılmıştır. Kromatografik sistem; C-18 kolon (250x4,60-5micron) ve 250-546 nm'ye ayarlı floresans dedektör kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Mobil faz olarak 1 ml/dk akış hızında hekzansülfonik asit sodyum tuzu içeren tamfton ve metanol (% 75:25) kullanılmıştır. İstatiksel değerlendirme, iki eş arasındaki farkın önemlilik testine göre yapılmıştır. Bulgular: B2 vitaminin alıkonma süresi yaklaşık 14 dakika olarak saptanmıştır. Enteral beslenme ürünlerindeki vitamin B2 miktarları ise 0,11 -0,40 mg/100 mi arasında tespit edilmiştir. Bu tespit edilen değerlerin, ürün etiketlerindeki değerlere uygunluk gösterdiği belirlenmiştir. Sonuç: Enteral beslenme ürünlerindeki vitamin B2 miktarlarının belirlenmesinde HPLC-FL (HPLC-Floresans Dedektör) kullanılabileceği görülmüştür. Ayrıca bu metodun duyarlı, uygulama süresi ve kolaylığı açısından avantajlı bir yöntem olduğu da düşünülmüştür.