Dergiler / Uluslararası Hematoloji-Onkoloji Dergisi / 2018 / Cilt: 28 - Sayı: 3
MATRA Aracılı miR-150’nin Transfeksiyonu ile İnsan Akut Myeloid Lösemi Hücrelerinde Resveratrol’ün MDM2,RUNX3,RB Gen Ekspresyonları ve Apoptoz Üzerine Etkisi
- Sayfa
- 147–153
- DOI
- —
Özet
Akut myeloid lösemi (AML), hematopoetik malignitelerin heterojen bir grubudur. “Magnet assisted transfection” (MATRA), non-viral transfeksiyon metodlarında oldukça etkilidir. Çalışmamızda; İnsan promiyelositik lösemi (HL-60) hücrelerine MATRA ile MicroRNA150 (miR-150) transfekte edilip; MDM2,RUNX3,RB gen ekspresyon değişimleri ve resveratrolün apoptotik etkisini değerlendirmeyi amaçladık. MATRA, miR-150 transfeksiyonu için non-viral taşıyıcı olarak kullanılmıştır. Hl-60 hücrelerinde Resveratrolün IC50 dozu, Fahri et al tarafından saptanmıştır. Resveratrol ve miR-150 ile transfekte edilmiş HL-60 hücrelerinde apoptoz ve MDM2, RUNX3, RB gen ekspresyon analizleri yapıldı. HL-60 hücrelerinde Resveratrolün IC50 dozu, 5 µM olarak saptandı. kontrol hücreleriyle karşılaştırıldığında; HL-60 hücrelerinde sırasıyla; miR-150, miR150-Resveratrol kombinasyonu, resveratrolün tek başına apoptozu 6.48, 6.93 ve 4.54 kat indüklediği tespit edilmiştir. Kontrol hücrelerine göre miR-150 tranfeksiyonu yapılanlarda MDM2, RUNX3, RB gen expresyonlarının sırasıyla 1.7, 1.3 ve 1.4 kat azaldığı; miR-150-resveratrol kombinasyonlarında ise MDM2 ekspresyonu 2.73 kat artmış; RUNX3 ve RB ekspresyonları sırasıyla; 6.1, 1.07 kat azalmıştır. Resveratrol ile kombinasyonda MDM2, RB sırasıyla 2.9 ve 1.4 kat azalmıştır. miR-150- resveratrol ve resveratrol kombinasyonları ile tedaviyi takiben gen ekspresyon değişimleri ve apoptotik etkiyi indüklemeleri; non-viral miR-150 transfeksiyonunun lösemi hücrelerinde etkili olabileceğini göstermektedir.
Abstract
Acute myeloid leukemia (AML) is a heterogeneous group of hematopoietic malignancies. Magnet assisted transfection (MATRA) is oneof the most effective non-viral transfection methods. We aimed to evaluate the apoptotic effect of resveratrol (RES), MDM2, RUNX3,RB gene expression exchanges and MicroRNA- 150 (miR-150) transfected with MATRA to HL-60 cells. MATRA was used as non-viralvector carrier for miR-150 transfection. IC50 dose of RES was determineted by Fahri et al. Resveratrol and miR-150 transfected cellswere performed apoptosis and MDM2, RUNX3, RB gene expression assays in Human promyelocytic leukemia (HL-60) cells. IC50 doseof RES was used as 5 μM. In HL-60 cells, it was found that miR-150, miR150-Resveratrol combination, resveratrol alone induces apoptosis by 6.48, 6.93 and 4.54 fold, respectively, compared to the control cells. Compared to control cells, MDM2, RUNX3, RB, geneexpressions decreased (miR-150) 1.7, 1.3 and 1.4 fold, (miR-150-resveratrol) MDM2 expression increased 2.73 fold, RUNX3 and RBexpression decreased 6.1, 1.07 fold, respectively. Combination with resveratrol, MDM2, RB decreased 2.9 and 1.4 fold, respectively.Non-viral miR-150 transfection may be effective in leukemia cells, induction of apoptotic effects and gene expression changes, following treatment with resveratrol and miR-150-resveratrol combinations.