Characterization of Glucose-6-phosphate dehydrogenase purified from lamb kidney cortex

Kuzu böbrek korteksinden saflaştırılan Glukoz-6-fosfat dehidrogenazın karakterizasyonu

Özet

Bu makalede kuzu böbrek korteksinden saflaştırılan glukoz-6-fosfat dehidrogenaz’ın bazı özellikleri tanımlanmaktadır. Glukoz-6-fosfat dehidrogenaz pentoz fosfat yolunun ilk basamağını katalizler. Enzim glukoz-6-fosfatı 6-fosfaglukonata oksitlerken, NADP+’ nın NADPH’ a redüksiyonunu gerçekleştirir. Glukoz-6-fosfat dehidrogenaz birçok mikroorganizma, bitki ve hayvan dokularından izole edilmiştir. Saflaştırma yöntemi ultrasantrifügasyondan sonra 2’, 5’-ADP Sepharose 4B affinite ve DEAE Sepharose Fast Flow iyon değiştirici kromatografisi olarak iki basamaktan oluşmaktadır. Enzimin moleküler ağırlığı Sephadex G-200 kromatografisi kullanılarak 67 kDa olarak bulundu. Enzim tarafından katalizlenen tepkimenin aktivasyon enerjisi ‘Arrhenius’ grafiğinden 2.67 kkal/mol olarak hesaplandı. Enzim için optimum pH 7.7 olarak belirlendi.

Abstract

This paper describes some properties of glucose-6-phosphate dehydrogenase, which is purified from lamb kidney cortex. Glucose-6-phosphate dehydrogenase catalyses the first step in the pentose phosphate pathway. The enzyme oxidizes glucose-6-phosphate to 6-phosphogluconate, reducing NADP+ to NADPH. Glucose-6-phosphate dehydrogenase has been isolated from a large number of microorganisms, plants and animal tissues. The purification consisted of two steps, 2’, 5’-ADP-Sepharose 4B affinity chromatography and DEAE Sepharose Fast Flow ion exchange chromatography. The molecular weight of the enzyme was found to be 67 kDa by Sephadex G-200 gel filtration chromatography. The activation energy of the reaction catalysed by the enzyme was calculated from the Arrhenius plot as 2.67 kcal/ mole. Optimum pH of the enzyme was determined as pH 7.7.