Glukagon benzeri peptid-1, insan umbilikal ven endotel hücrelerini yüksek glukoz varlığında PI3K/Akt/eNOS sinyal yolu ile etkiler

Glucagon-like peptide-1 affects human umbilical vein endothelial cells in high glucose by the PI3K/Akt/eNOS signaling pathway

Özet

Amaç: Glukagon benzeri peptit-1‘in (GLP-1)Y yüksek glukoz varlığında insan göbek bağı ven endotel hücrelerinin (HUVEC‘ler) apoptozu üzerine etkilerini ve ilgili mekanizmaları araştırmak. Gereç ve Yöntem: HUVEC‘ler 48 saat boyunca farklı koşullar altında büyütüldü. Hücrelerin apoptoz oranı flow sitometri ile tespit edildi, p-Akt‘in ve p-eNOS ekspresyonu, Western blot ile ölçüldü ve NO üretimi, NO assay kiti ile tespit edildi. Bulgular: HUVEC‘ler yüksek glukozda inkübe edildi, hücrelerin apoptoz oranı arttı, p-Akt ve p-eNOS ifadesi azaldı ve NO üretimi azaldı. Yüksek glukoza GLP-1 ilave edildikten sonra, hücrelerin apoptoz oranı, p-Akt ve p-eNOS‘un ekspresyonunu önemli ölçüde düştü ve NO üretimi belirgin bir şekilde arttı. Exendini takiben, yüksek glukozlu hücrelere wortmannine ve GLP-1 eklenenhücrelere de L-NAME eklendi, ekstendin, wortmannine ve L-NAME, hücre apoptozunu arttıran, p-Akt ve p-eNOS ekspresyonunu aşağı regüle ederek, NO üretimini düşürdü. Ancak L-NAME, p-Akt‘in ekspresyonu üzerinde herhangi bir fark yaratmadı. Sonuç: GLP-1, PI3K/Akt/eNOS yolağının yukarı regülasyonu yoluyla HUVEC‘lerde Akt ve eNOS ekspresyonunu arttırdı ve yüksek glukozda HUVEC‘lerin apoptoz oranını düşürdü.

Abstract

Objectives: To investigate the effects of glucagon-likepeptide-1 (GLP-1) for the apoptosis of human umbilicalvein endothelial cells (HUVECs) in high glucose and therelated mechanisms.Material and methods: HUVECs were cultured under differentconditions for 48 h. The apoptosis rate of cells wasdetected by flow cytometry, the expression of p-Akt andp-eNOS was measured by Western blot, and the productionof nitric oxide (NO) was detected by NO assay kit.Results: HUVECs were incubated in high glucose, theapoptosis rate of cells increased, the expression of p-Aktand p-eNOS reduced, and the production of NO decreased.After GLP-1 was added into the high glucose, the apoptosisrate of cells significantly reduced, the expression ofp-Akt and p-eNOS and the production of NO obviouslyincreased. After exendin, wortmannine and L-NAME wereadded into high glucose and GLP-1, respectively, exendin,wortmannine and L-NAME increased the cell apoptosis,down-regulated the expression of p-Akt and p-eNOS anddropped the production of NO, except that L-NAME madeno difference on the expression of p-Akt.Conclusion: GLP-1 increased the expression of Akt andendothelial nitric oxide synthase (eNOS) in HUVECsvia the up-regulation of PI3K/Akt/eNOS pathway anddecreased the apoptosis rate of HUVECs in high glucose.