Lysimachia verticillaris L.’nin Kolinesteraz ve Tirozinaz İnhibitör Etki Potansiyeli ve Antioksidan Kapasitesi ile Ana Bileşiklerinin İzolasyonu

Cholinesterase and Tyrosinase Inhibitory Potential and Antioxidant Capacity of Lysimachia verticillaris L. and Isolation of the Major Compounds

Fatma Sezer ŞENOL DENİZ, Ahmet C. GÖREN, Karel ŠMEJKA, Jiri VACLAVIK, lkay ERDOĞAN ORHAN, Emil SVAJDLENKA, Milan ŽEMLIČKA, Ufuk ÖZGEN, Sıla Özlem ŞENER

Özet

maç: Bu çalışmanın amacı, Lysimachia verticillaris’in (LV) kolinesteraz, tirozinaz inhibitör etkisini ve antioksidan aktivitesini değerlendirerek nörodejeneratif hastalıklar için terapötik potansiyelini belirlemek ve en etkili fraksiyondan hareketle ana bileşiklerini izole etmektir.Gereç ve Yöntemler: Biyolojik aktivite ve izolasyon çalışmaları için LV’nin metanol ekstresinden hareketle kloroform, EtOAC ve sulu fraksiyonları elde edilmiştir. Etkili EtOAC fraksiyonundan, yarı preparatif yüksek performanslı sıvı kromatografisi (YBSK) yöntemi ile 7 ana bileşik izole edilmiştir. İzole edilen bileşiklerin yapıları çeşitli spektroskopik yöntemler kullanılarak aydınlatılmıştır. Metanol ekstresi (ME) ve tüm fraksiyonların asetilkolinesteraz (AChE), butirilkolinesteraz (BChE), tirozinaz inhibitor etkileri ve antioksidan potansiyelleri ELISA yöntemleri kullanılarak belirlenmiştir.Bulgular: En yüksek AChE inhibitor etki EtOAc fraksiyonunda (%63,37±1,74), en yüksek BChE inhibitör etki ME’de ve etil asetat fraksiyonunda (%85,84±3,01 ve %83,82±3,93), en yüksek total fenolik içeriği etil asetat fraksiyonunda (261,59±3,95 mg gallik asit eşdeğeri/g ekstre), en yüksek total flavonoit içeriği etil asetat fraksiyonunda (515,54±2,80 mg kersetin eşdeğeri/1 g ekstre) gözlenmiştir. En yüksek 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil radikal süpürücü etki ve demir azaltıcı antioksidan güç değerleri ise su ve EtOAC fraksiyonlarında sırasıyla %92,54±0.67, %92,11±0,30 ve 2,318±0,054 2,224±0,091 olarak belirlenmiştir. Aktivite sonuçlarına dayanarak izolasyon çalışmalarının etil asetat fraksiyonunda yürütülmesine karar verilmiştir. Etil asetat fraksiyonundan, gallik asit (1), (+) kateşin (2), mirsetin 3-O-arabinofuranozit (3), mirsetin 3-O-α-ramnopiranozit (4), kersetin 3-O-β-glukopiranozit (5), kersetin 3-O-arabinofuranozit (6) ve kersetin 3-O-α-ramnopiranozit (7) ana bileşikleri izole edilmiştir.Sonuç: LV, güçlü antioksidan aktivitesiye sahip olması ve referans bileşiklerle karşılaştırıldığında benzer kolinesteraz inhibitor etki göstermesi nedeniyle nörodejeneratif hastalıkların tedavisi için potansiyel bir bitkisel ilaç kaynağı olabilir.

Abstract

Objectives: The scope of the present study was to specify the therapeutic potential for neurodegenerative diseases through evaluating cholinesterase and tyrosinase (TYR) inhibitory and antioxidant activity of Lysimachia verticillaris (LV), and to isolate the major compounds considering the most active fraction.Materials and Methods: The methanol extract (ME) of LV and the chloroform, ethyl acetate (EtOAC), and aqueous fractions obtained from it were used for biological activity and isolation studies. The ME and all fractions were tested for their acetylcholinesterase (AChE), butyrylcholinesterase (BChE), and TYR inhibitory and antioxidant potentials using ELISA microtiter assays. Seven major compounds were isolated from the active EtOAC fraction by semi-preparative high performance liquid chromatography. The structures of the compounds were elucidated by several spectroscopic methods. Results: Marked AChE inhibitory activity was observed in the EtOAC fraction (6337±1.74%), BChE inhibitory activity in the ME and EtOAC fraction (85.84±3.01% and 83.82±3.93%), total phenol content in the EtOAC fraction (261.59±3.95 mg equivalent of gallic acid/1 g of extract) and total flavonoid contents in the EtOAC fraction (515.54±2.80 mg equivalent of quercetin/1 g of extract), and 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical scavenging activity and ferric-reducing antioxidant power values in the aqueous and EtOAC fractions (92.54±0.67%, 92.11±0.30%; 2.318±0.054, 2.224±0.091, respectively). Accordingly, the isolation studies were carried out on the EtOAC fractions. Compounds 1-7 (gallic acid, (+)-catechin, myricetin 3-O-arabinofuranoside, myricetin 3-O-α-rhamnopyranoside, quercetin 3-O-β-glucopyranoside, quercetin 3-O-arabinofuranoside, and quercetin 3-O-α-rhamnopyranoside, respectively) were isolated from the active EtOAC fraction. Conclusion: LV may be a potential herbal source for treatment of neurodegenerative diseases based on its strong antioxidant activity and significant cholinesterase inhibition similar to that of the reference.