K562 Kronik Myeloid Lösemi Hücrelerinin Yeniden Hücre Programlanmasına Yatkınlığı

Özet

Amaç: Kanser hücrelerinin yeniden programlanarak hastalık modellerinin oluşturulması, hastalığın ilerleyişini, patolojisini ve ilaç duyarlılığını incelemek için önemli bir teknolojidir. Kanser hücrelerinde yeniden programlama çalışmalarını gerçekleştirmeden önce, hücrelerin programlamaya yatkınlığını değerlendirmek önemlidir. Kronik myeloid lösemi K562 hücrelerinin kanser programlama çalışmalarında kullanılabilirliğini göstermek amacıyla bir kavram kanıtı çalışması gerçekleştirdik. Gereç ve Yöntemler: Yeniden programlama faktörleri, pluripotensi belirteçleri ve tümör baskılayıcı genlerin ifadeleri, gerçek zamanlıpolimeraz zincir reaksiyonu ve akan hücre sitometrisi ile gen ve protein seviyelerinde analiz edildi. Programlama çalışmalarında en çok kullanılan insan periferik kan mononükleer hücreleri (PBMC) pozitif kontrol olarak kullanıldı. Bulgular: K562 hücrelerinin, yeniden programlama faktörlerini ve pluripotency belirteçlerini PBMC hücrelerine göre daha yüksek seviyede ifade ettiği gösterilmiştir. Uyarılmış pluripotent kök hücrelerinin oluşumu sırasında ana düzenleyicilerden biri olan p53’ün ifadesi, K562 hücrelerinde PBMC’ye kıyasla daha düşük bulunurken, diğer tümör baskılayıcı genler daha yüksek ifade göstermiştir. Sonuç: Bu çalışma, sağlıklı insan PBMC’lerine benzer şekilde, K526 hücrelerinin yeniden programlama çalışmalarında kullanılabileceğini göstermiştir. Lösemi kaynaklı uyarılmış pluripotent kök hücreleri kullanılarak in vitro ortamda hastalık modellerinin üretilmesi, bilim insanlarının ilaç dirençlerini daha iyi anlaması ve yeni tedavi hedefleri geliştirilmesi için önemli bir araç olacaktır.

Abstract

Objective: Cancer cell reprogramming is a potential tool to studycancer progression, disease pathology, and drug sensitivity. Prior toperforming cancer reprogramming studies, it is important to evaluatethe stemness predisposition of cells that will be reprogrammed. Weperformed a proof-of-concept study with chronic myeloid leukemiaK562 cells in order to evaluate their tendency for cancer cellreprogramming.Materials and Methods: Expression of reprogramming factors,pluripotency markers, and tumor-suppressor genes was analyzed atgene and protein levels via real-time reverse transcription-polymerasechain reaction and flow cytometry. Human peripheral bloodmononuclear cells (PBMCs) were used as a positive control.Results: K562 cells were shown to express higher levels of most of thereprogramming factors and pluripotency markers. Expression of p53,which is one of the main regulators during the generation of inducedpluripotent stem cells, was found to be lower in K562 cells comparedto PBMCs, whereas the other tumor-suppressor genes showed higherexpression levels.Conclusion: This study suggested that, similar to healthy humanPBMCs, K526 cells could be used in cancer cell reprogramming studies.Generating induced pluripotent stem cells from leukemia cells couldhelp scientists to establish chronic myeloid leukemia models in vitrofor a better understanding of therapy resistance and development ofnovel therapeutic targets.