Dergiler / Turkish Journal of Hematology / 2019 / Cilt: 36 - Sayı: 4
Diffüz Büyük B Hücreli Lenfomada, Stres Kaynaklı Erken Hücresel Yaşlanma (Senesens), SENEX ve $p^{16INK4a/-}$ Retinoblastom (Rb) Yolağını Aktive Ederek Proliferasyonu Artırır
- Sayfa
- 247–254
- DOI
- —
Özet
Amaç: Hücresel yaşlanmanın tümör oluşumuna karşı önemli bir engel olduğu düşünülmektedir. Son çalışmalarda stresin tetiklediği erken yaşlanmanın (senesens) (SIPS) kısmi tümör invazyonunu kolaylaştırabileceği gösterilmiş olmakla birlikte SIPS’nin diffüz büyük B hücreli lenfomayı (DBBHL) nasıl etkilediği bilinmemektedir. Çalışmada bu konunun ele alınması amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntemler: LY8 hücre dizisinin immünfenotipi akış sitometri ile belirlendi. Tert-butil hidroksiperoksitin (tBHP) oluşturduğu SIPS β-galaktozidaz boyası ile tesbit edildi. Hücre proliferasyonu CCK8 ile analiz edildi ve ARGHAP18 (SENEX genini kodlayan protein), p16/p21 ve pRb ekspresyon seviyeleri western-blot ile ölçüldü. LY8 hücreleri SENEX-SiRNA/NC ile transfekte edilerek western-blot ile gösterildi. Bulgular: Sonuçlarımıza göre LY8 hücre dizisinin immünfenotipi CD19, CD20 ve CD10 pozitiftir ve immünoglobulin hafif zinciri kappadır. DBBHL’de hücresel yaşlanma modeli 30 µM tBHP ile başarılı bir şekilde oluşturulabilir. ARHGAP18, p21,p16 ve Rb protein seviyeleri anlamlı olarak arttı fakat pRb ekspresyon seviyeleri diğer gruplarla karşılaştırıldığında SIPS grubunda azaldı. Bu arada, SIPS grubunda, diğer tBHP grubu ile karşılaştırıldığında proliferasyon hızı daha çok arttı. Ek olarak, p21 ve p16 ekspresyonları SENEX-SiRNA grubunda, negatif kontrol grubu ile karşılaştırıldığında anlamlı ölçüde azaldı. Sonuç: SIPS oluşumu ARHGAP18 ve p16/Rb yolağını aktive eder ve DBBHL hücrelerinin proliferasyonunu artırır. Ek olarak SENEX DBBHL’da p16 yolağını aktive eder. SIPS DBBHL’de SENEX ve p16/ Rb yolağını aktive ederek proliferasyonu destekler. SENEX ilişkili SIPS relaps/refrakter DBBHL tedavisinde önemli bir hedef olabilir.
Abstract
Objective: Cellular senescence has been thought to be an importantbarrier to tumor formation. Recent studies have shown that stressinduced premature senescence (SIPS) can promote partial tumorinvasion, but how SIPS affects diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL)remains inconclusive. This study aimed to address that issue.Materials and Methods: The immunophenotype of the LY8 cellline was measured with flow cytometry. SIPS induced by tert-butylhydroperoxide (tBHP) was detected by senescence β-galactosidasestaining. Cell proliferation was analyzed with CCK8 and expressionlevels of ARHGAP18 (SENEX gene-encoding protein), p16/p21, andRb/pRb were measured with western blot. LY8 cells were transfectedwith SENEX-SiRNA/NC and verified by western blot.Results: Our results suggested that the immunophenotype of the LY8cell line is CD19-, CD20-, and CD10-positive and the immunoglobulinlight chain is the kappa type. The cellular senescence model of DLBCLcould be successfully induced by 30 µM tBHP. ARHGAP18, p21, p16,and Rb protein levels were significantly increased but the level ofpRb expression was decreased in the SIPS group compared with othergroups. Meanwhile, the proliferation rate was increased in the SIPSgroup more than other tBHP groups. Furthermore, the expressions ofp21 and p16 were significantly decreased in the SENEX-SiRNA groupcompared with the negative control group.Conclusion: SIPS formation activates ARHGAP18 and the p16/Rbpathway and promotes DLBCL cell proliferation. Furthermore, SENEXactivates the p16 pathway in DLBCL. SIPS promotes proliferation byactivating SENEX and the p16/Rb pathway in DLBCL. SENEX-relatedSIPS may serve as an important target for relapsed/refractory DLBCLtherapy.