Comparison of the formats of three ELISA (PAS-ELISA, ACP-ELISA, indirect ELISA kit) and reagents for detection of some viruses infecting cucurbits

Kabakgil viruslarının teşhisinde kullanılan ELISA tiplerinin (PAS-ELISA, ACP-ELISA, indirekt ELISA) ve bazı kimyasalların etkinliklerinin karşılaştırılması

Özet

Bu çalışmada Hıyar Mozayık (CMV), Papaya Halkalı Leke Virus tip-W (PRSV-W), Kabak Mozayık (SqMV), Karpuz Mozayık (WMV) ve Zucchini Sarı Mozayık (ZYMV) viruslarının teşhisinde Protein-A ELISA (PAS-ELISA), Antijen Kaplı ELISA tabağı ve ticari olarak mevcut olan Indirekt ELISA yöntemleri ve bazı kimyasallar karşılaştırılarak en uygun metod belirlenmiştir. Hıyar mozayık virüsü her üç ELISA metodu ile de teşhis edilmiştir. Fakat bu virüsün tesbil edilmesinde PAS-ELISA ve Indirekt ELISA yöntemleri daha iyi bir performans göstermiştir. Kabak mozaik virüsü sadece PAS-ELISA yöntemi ile tespit edilmiş, diğer iki metot bu virüsün teşhisinde istenen sonucu verememiştir. Üç potyvirus PRSV-W, WMV, ZYMV kendilerine ait antiserumlar ile saptanabilmiş ancak her üç ELISA yönteminde de antiserumlar ve viruslar arasında çapraz reaksiyonlar tesbit edilmiştir. Bu çalışmadan çıkan sonuçlara göre, eğer rutin virüs teşhisi ve arazi survey çalışmaları yapılacaksa indirekt ELISA (SqMV hariç) en uygun yöntem olarak tespit edilmiştir. Çünkü bu metot kısa zaman (5 saat) içerisinde, az emek sarf ederek ve daha az kimyasal kullanarak yapılabilmektedir. Eğer izolatlar ve ırklar arasında serolojik farklılıklar ve virüs antijen yoğunluklarının belirlenmesi amaçlanıyorsa PAS-ELISA yönteminin daha uygun bir metot olduğu söylenebilir. Çünkü bu metot uzun zaman ve daha fazla iş gücü gerektirmesine rağmen bu virusların teşhisinde daha hassas ve spesifik sonuçlar verdiği saptanmıştır.

Abstract

Formats of protein- A ELISA (PAS-ELISA), antigen coated plate ELISA (ACP-ELISA), and indirect ELISA kit were evaluated and compared for their usefulness in detection of cucumber mosaic virus (CMV), papaya ringspot virus type -W (PRSV-W), squash mosaic virus (SqMV), watermelon mosaic virus (WMV), and zucchini yellow mosaic virus (ZYMV). CMV was delected by CMV antiserum without any cross-reaction in three ELISA formats. SqMV was detectable by this antiserum in PAS-ELISA, not in ACP-ELISA and indirect ELISA kit formats. The three potyviruses, PRSV-W, WMV, and ZYMV, reacted with antisera of these viruses and gave cross-reaction with all three anlisera in three ELISA formats. Our results indicated that indirect ELISA kit was more suitable to detect cucurbit viruses (CMV, PRSV-W, WMV, ZYMV) in field surveys and sample diagnosis because of its speed and usefulness; however, PAS-ELISA was more convenient to detect SqMV.