Combination of swim-up and density gradient separation methods effectively eliminate DNA damaged sperm

Yüzdürme ve dansite gradient ayırma metotlarının kombinasyonu DNA hasarlı spermleri etkili bir şekilde uzaklaştırır

Satish Kumar ADİGA, Surveen GHUMMAN, Varshini JAYARAMAN, Satish Bola RAO, Pratap KUMAR, Dinesh UPADHYA, Guruprasad KALTHUR

Özet

Amaç: Bu deneysel prospektif çalışmanın amacı tek ve kombinasyon sperm yıkama metotlarının, DNA’sı sağlam spermatozoa izolasyon etkinliklerini araştırmaktı. Gereç ve Yöntemler: Sperm DNA hasarı erkek farelerde lokal testiküler ışınlama ile oluşturuldu ve hasarın büyüklüğü comet assay ile ölçüldü. Spermatozoa’ya tek (yüzdürme veya dansite gradient metodu) ve ayrıca kombinasyon sperm yıkama teknikleri uygulandı. Yıkama tekniklerinin çeşitli alt fraksiyonlarında DNA’nın bütünlüğü değerlendirildi. Bulgular: Tek yıkama tekniği uygulandığında DNA hasarlı sperm miktarı fraksiyonlar arasında farklılık göstermedi. Bununla beraber, dansite gradienti ve yüzdürme tekniklerinin kombinasyonu son popülasyondaki DNA hasarlı sperm sayısını anlamlı olarak (p

Abstract

Objective: The aim of this experimental prospective study was to investigate the efficacy of single and combination sperm wash methods for their ability to isolate DNA intact spermatozoa. Material and Methods: Sperm DNA damage was introduced by local testicular irradiation in male mice and the extent of damage was quantified by comet assay. The spermatozoa were subjected to single (swim up or density gradient method) and also a combination of sperm wash techniques. The DNA integrity in various sub-fractions of wash techniques was evaluated. Results: The amount of DNA damaged sperm did not differ between individual fractions when single wash technique was applied. However, a combination of density gradient and swim-up techniques significantly reduced (p