Growth inhibiting effects of progesterone, 17beta-estradiol and 2-methoxyestradiol on human endothelial cells

Progesteron, 17beta-estradiol ve 2-metoksiestradiolün insan endotelyal hücrelerdeki büyümeyi inhibe edici etkisi

Charlotte, Christoph KECK, Detlef PIETROWSKI, Bernhard BARLEON, Dieter MARME, SCHURLE

Özet

Amaç: Anjiyogenez mevcut mikro damar yapısından yeni kapiller kan damarı oluşumudur. Bu olay omurgalılarda çeşitli patolojik ve patolojik olmayan süreçler açısından önemlidir. Estradiol ve bazı metabolitlerinin anjiyogenezi engellediği ve çeşitli dokularda morfogenezi indüklediği gösterilmiştir. Materyal ve Metot: Hücreleri boyamak için çeşitli antikorlar ile immün histokimya kullanılmıştır. Coulter counter kullanılarak IC50 konsantrasyonları belirlendi ve Flow cytometry ile apoptotik yolun erken bir bulgusu olan fosfatidilserin ayrışması analiz edildi. Sonuçlar: Steroidler; progesteron, 17-estradioller ve hatta 2-metoksiestradiolün çeşitli primer endotelyal hücre kültürleri üzerinde kuvvetli proliferasyonu inhibe edici etkisi olduğu tespit edildi. 2-metoksiestradiolün büyümeyi inhibe edici etkisi devamlı ve bFGF ile proliferasyonu indüklenmiş endotelyal hücre kültürlerinde benzer oranda gerçekleşmektedir. Prolifere olan endotelyal hücre kültürlerindeki bu etki sitotoksisiteye bağlı değil, fakat FACS analizi ile gösterildiği gibi muhtemelen apoptotik mekanizmalar ile gerçekleşmektedir. Tartışma: Sonuçlarımız 2-metoksiestradiolün insan endotelyal hücreleri üzerindeki büyümeyi inhibe edici etkisinin bir apoptotik mekanizma ile ortaya çıktığını göstermektedir. Ayrıca 2-metoksiestradiolün antiproliferatif etkisinin endotelyal hücre proliferasyonundan bağımsız gerçekleştiği görülmektedir.

Abstract

INTRODUCTION: Angiogenesis is the formation of new capillary blood vessels by sprouting from existing microvasculature. It is critical for a variety of pathological and non-pathological processes in vertebrates. Some Estradiols and their metabolites have been shown to inhibit angiogenesis and promote morphogenesis in a variety of tissues. METHODS: Immunocytochemistry were used to stain the cells with various antibodies. The IC50 concentration was determined using a coulter counter and Flow cytometry was used to analyze the externalization of phosphatidylserine as an early event in the apoptotic pathway. RESULTS: We found that the steroids progesterone and 17beta-estradiols as well as 2-methoxyestradiol had strong proliferation inhibiting properties on different primary cultures of endothelial cells. The growth inhibiting effect of 2-methoxyestradiol occurs in confluent and in bFGF-induced proliferating cultures of endothelial cells at similar concentrations. In proliferating cultures of endothelial cells this effect occurs not due to cytotoxicity but seems to be mediated by an apoptotic mechanism as shown by FACS analysis. CONCLUSION: Our results show that the growth inhibition effect of 2-Me in human endothelial cells occurs by an apoptotic mechanism. Moreover it demonstrates that the antiproliferative effects of 2-Me are independent of the proliferation status of endothelial cells.