Marmara Bölgesindeki sağlam koyunların kan serumlarında ELISA yöntemi ile Listeria monocytogenes'e karşı oluşan antikorların saptanması ve listeriozis üzerinde etiyolojik-epizootiolojik çalışmalar

Listeriosis in the Marmara Region and the detection of antibodies to Listeria monocytogenes in the sera of clinically healthy sheep by ELISA

Özet

Bu çalışmada Marmara Bölgesindeki sağlıklı koyunların kan serumlarında Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ile Listeria monocytogenes'e karşı oluşan spesifik antikorlar araştırıldı. Antijen olarak dializ membran filtreleri ile elde edilen Listeriolysin O, L.monocytogenes serotip 1/2a ve serotip 4b'nin somatik O antijenleri kullanıldı.Toplanan 1000 koyun serumu 3 farklı antijene göre test edildi ve sonuçlar karşılaştırıldı. ELISA sonuçlarında, kan serumlarında Listeriolysin O antijenine %3.6, somatik l/2a'ya %11.5 ve somatik 4b'ye karşı %10.4 oranında pozitiflik saptandı.Ayrıca, çalışmada laktasyon dönemindeki koyunların süt ve dışkılarından etken izolasy-onu yapıldı. FDA yöntemi ile süt örneklerinden yapılan izolasyon çalışmalarında PALCAM Ağar ve Listeria Selektif Ağar (Oxoid), soğuk zenginleştirme yöntemi ile dışkılardan yapılan izolasyon çalışmalarında da Listeria Selektif Ağar (Oxoid) ve Listeria Selektif Ağar (Merck) besiyerleri kullanıldı.Sağım yolu ile koyunlardan sterirköşullarda alınan 100 süt örneğinde Listeria etkenleri saptanmadı. 180 koyunun rektumundan alınan dışkı örneklerinin yapılan araştırmasında iki L.monocytogenes, iki L.innocua, iki L.welshimeri, bir L.grayi ve bir L.murrayi suşu izole edildi.

Abstract

In this study, the presence of antibodies to Listeria monocytogenes were investigated in sheep sera by Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) in the Marmara region. Listeriolysin O was obtained from the supernatant of cultured L.monocytogenes using dialysing membran and used in ELISA. Whole cell antigens of L.monocytogenes serotypes l/2a and serotype 4b were also used as antigens.A thousand sheep sera tested by ELISA using three different antigens. Antibodies to liste-riolysin O were detected in 3.6% sheep sera while antibodies to serotype l/2a and serotype 4b have been detected 11.5% and 10.4% respectively.In addition to serology, isolation and identification studies were also performed in milk and feaces of sheep. The heat enrichment method was used for isolation from milk samples using PALCAM and LSA (Oxoid). The cold enrichment method was used from feaces using LSA (Oxoid) and LSA (Merck). No Listeria was isolated from 100 milk samples taken in sterile condition by hand milk-ing. Whereas, two L.monocytogenes, two L.innocua, two L.welshimeri, one L.grayi and one L.murrayi were isolated from the feaces of 180 sheep taken from rectum.