Measurement of lethal effect of diphtheria toxin on various cell lines by MTT colorimetric assay

Difteri toksininin değişik hücre suşları üzerine öldürücü etkisinin MTT kolorimetrik deney ile ölçümü

Özet

Değişik hücre suşları (Sp2, L/937, RAW264.7, K562, B16-FO, Vero, Ray;, Daudi ve L929) üzerine difteri toksininin (DT) öldürücü etkisi araştırıldı. Difteri toksininin öldürücü etkisi kolorimetrik 3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) deneyi kullanılarak değerlendirildi. Değişik hücre suşları DT'nin yokluğunda ve 10 Lf/ml konsantrasyondaki varlığında 72 saat kültürü yapıldı. Difteri toksini bu çalışmada kullanılan hücre suşlarınm hepsine karşı sitotoksik etki gösterdi. Kullanılan hücre suşları arasında Raji'nin diğer hücreler ile karşılaştırıldığında kısmen dirençli olduğu saptandı. Doza bağımlı etkinin gözlenmesi amacı ile seçilen iki hücre susunun (RAW264.7 ve L929) değişik DT konsantrasyonlarında inkübasyonu yapıldığında bu hücrelere karşı DT'nin gösterdiği sitotoksik etkinin doza bağımlı olduğu saptandı.

Abstract

The lethal effects of diphtheria toxin (DT) on various cell lines (Sp2, U937, RAW264.7, K562, B16-FO, Vero, Raji, Daudi, and L929) were investigated. Lethal effect of DT was assessed by using the 3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) colorimetric assay. Various cell lines were cultured in the absence and the presence of DT at 10 Lf/ml for 72 h. Diphtheria toxin demonstrated cytotoxicity against all of the cell lines used in this study. Among the cell lines used, Raji was relatively resistant to cytotoxic effect of DT when compared to others. When two cell lines (RAW264.7 and L929), chosen for dose dependent "effect, were incubated with various concentrations of DT, it was observed that cytotoxicity of DT against these cell lines occured in a dose dependent manner.