Hipertermide tuba uterina yapısı

Özet

Amaç: Vücut sıcaklığı 41°C ya da daha üst bir değere yükseldiğinde hipertermi oluşur ve bu ısı denetim düzeneklerinin bozulmasına yol açabilir. Tuba uterinada sıcaklığın artması silli hücrelerin apoptozisine, epitel hücrelerinde oksidatif stres gelişimine ve erken embriyonik ölümlere neden olur. Süperoksit dismutaz (SOD) serbest oksijen radikallerini ortadan kaldırarak oksidatif stresi engelleyebilen ve apoptotik süreci geri döndürebileceği düşünülen bir antioksidandır. Bu çalışmada; hipertermi ile oluşturulan ısı stresinin ve stres öncesinde kullanılan SOD un, tuba uterina üzerindeki koruyucu etkilerinin apoptotik ve oksidatif stres belirteçleri kullanılarak immünohistokimyasal olarak belirlenmesi amaçlanmıştır. Yöntemler: Çalışmada kullanılan 18 adet Wistar-albino cinsi dişi sıçanlar, her grupta 6 denek olacak şekilde 3 gruba ayrılmıştır. Kontrol grubundaki denekler, sıcaklığı 22° Cye ayarlanmış havuzda 20 dakika süre ile tutulmuş ve 24 saat sonra kesilmiş, ikinci ve üçüncü gruptaki denekler ise; sıcaklığı 42°C ye ayarlanmış havuzda 20 dakika bekletilerek sırasıyla 30. dakika ve 24. saatte kesilerek tuba uterina dokuları alınmıştır. Hipertermi uygulaması yapılan gruplara, uygulamadan 1 saat önce NaCl+Katalaz+SOD enjeksiyonu yapılmıştır. Alınan dokulara, hiperterminin neden olduğu apoptozisi belirlemek için Kaspaz-3, Kaspaz-8 ile Kaspaz-9 protein yapılarına etkisinin belirlenebilmesi amacıyla HSP-70 primer antikorlarıyla indirekt immünohistokimyasal yöntem uygulanmıştır. Bulgular: Yapılan değerlendirmelerde; Kaspaz-9 tutulumunun daha belirgin olduğu saptanmıştır. İmmünoreaktivitenin özellikle epitelde, hücre sitoplazmasında ve silyalarda, hipertermi uygulamasına koşut arttığı izlenmiştir. Kaspaz-3 tutulumunun hipertermi ile çok belirgin artmadığı saptanmıştır. Tüm kaspazlar için SOD uygulamasının süreye koşut tutulumu azalttığı gözlenmiştir. HSP-70 tutulumunun genelde epitel hücrelerinde sitoplazmik düzeyde ve orta dereceli olduğu, SOD uygulaması ile tutulumun süreye koşut arttığı belirlenmiştir. Sonuç: Sonuç olarak apoptotik programın merkezi bileşenleri olan kaspazların aktivasyonuyla, hiperterminin özellikle epitel hücrelerinde dış yolaktan apoptozisi başlattığı yargısına varılmıştır. Ancak SOD uygulamasının süreye koşut apoptozisi baskıladığı, bunun da artan HSP-70in koruyucu etkisi aracılığıyla gerçekleşmiş olabileceği sonucuna varılmıştır.

Abstract

Objective: When the body temperature reaches the value of 41°C or higher hyperthermia occurs and this may lead to the destruction of heat regulation mechanisms. The rise of temperature within the fallopian tubes (tuba uterina) leads to apoptosis of ciliated cells, development of oxidative stress and early embryonic death. Superoxide dismutase (SOD) is an antioxidant believed to be able to prevent oxidative stress and reverse apoptotic process by removing free oxygen radicals. This study aims to immunohistochemically detect protective effects of heat stress caused by hyperthermia, SOD used before the stress on tuba uterina by using apoptotic and oxidative stress markers. Methods: 18 Wistar-albino female rats used within the study were separated into 3 groups, with 6 rats in each group. Test subjects within the control group were held for 20 minutes in the pool of 22°C and dissected 24 hours later. Subjects of second and third groups were held for 20 minutes in the pool of 42°C, and respectively dissected 30 minutes and 24 hours later, and their tuba uterina tissues removed. Groups where hyperthermia was applied were injected with NaCl+Catalase+SOD one hour before. In order to determine apoptosis caused by hyperthermia, removed tissues were subjected to indirect immunohistochemical method with HSP-70 primary antibodies to detect impact on Caspase-3, Caspase-8 and Caspase-9 protein structures. Results: Through conducted assessments it was determined that Caspase 3 retention was more evident. It was tracked that parallel to hyperthermia application immunoreactivity increased especially in epithelia, cell cytoplasm and cilias. It was detected that Caspase 3 retention does not increase significantly with hyperthermia. It was observed that for all caspases SOD application reduces retention parallel to time. It was identified that HSP-70 retention occurs generally in epithelia cells on cytoplasm level moderately, and with SOD application retention increases parallel to time. Conclusion: It was concluded that with the activation of caspases, the central components of apoptotic program, especially in epithelia cells hyperthermia starts apoptosis from the external pathway. It was deduced that SOD+Catalase application represses apoptosis parallel to time, which probably happens due to the increased HSP-70's protective effect.