Enalapril uygulanan diyabetik sıçan böbrek dokularında TRPM2 kanal immunreaktivitelerinin belirlenmesi

Determination of renal TRPM2 channels immunoreactivities in enalapril administrated diabetic rats

Özet

Amaç: Diyabet hayat boyu süren, hastanın yaşam kalitesini azaltan, morbiditesi ve mortalitesi yüksek kronik metabolik bir hastalıktır. Bu çalışmada streptozotosin (STZ) ile oluşturulan diyabetik sıçan modelinde böbrek hasarı üzerine enalaprilin etkilerinin belirlenmesi amaçlandı. Bu amaçla apoptotik süreçte etkili olan melastatine bağlı transient receptor potential 2 (TRPM2) iyon kanallarının immünreaktivitesi belirlendi. Gereç ve Yöntem: Çalışmada 21 adet Wistar Albino cinsi erkek sıçan 3 gruba ayrıldı. Kontrol (Grup I) grubundaki deney hayvanlarına deney süresince hiçbir uygulama yapılmadı. Diyabetik (Grup II) gruba 60 mg/kg olacak şekilde tek doz STZ 0,1 M fosfat-sitrat tamponunda (pH: 4.5) çözdürülerek intraperitoneal yolla uygulandı. Grup III’teki sıçanlara diyabet oluştuktan sonra 10 hafta süre ile 5 mg/kg/gün enalapril oral yoldan verildi. Deneyin 10. haftasında tüm gruplardaki sıçanlar dekapite edildi. Böbrek dokuları %10’luk formaldehite alındı ve parafin bloklar hazırlandı. 5 μm ‘lik parafin kesitlere avidin-biyotin peroksidaz metodu uygulanarak TRPM2 iyon kanalı immünreaktivitesi değerlendirildi. İmmünreaktivitenin şiddeti ve yaygınlığı +1 zayıf, +2 orta dereceli, +3 şiddetli olarak skorlanıp semi-kantitatif olarak değerlendirildi. Bulgular: Yapılan immünohistokimyasal boyamanın ışık mikroskobik incelenmesinde, TRPM2 immünreaktivitesi, kontrol grup böbrek dokularında hafif şiddetli (+1) iken diyabetik böbrek dokusunda oldukça yaygın ve şiddetli (+3) olarak gözlendi. Tedavi grubundaki böbrek dokularında ise immünreaktivite orta dereceli +2 şiddetinde ayırt edildi. Sonuç: Bu çalışmanın sonuçları enalapril uygulamasının, apoptotik süreçte ve diyabetik nefropati gelişiminde etkili olduğu düşünülen TRPM2 kanal immünreaktivitesini azaltarak diyabetik renal hasara karşı koruyucu etki sağladığını gösterdi.

Abstract

Objective: Diabetes is a lifetime metabolic disease which reduces quality of life and increases morbidity and mortality. In this study, it was aimed to investigate the effects of enalapril on renal damage in Streptozotocin (STZ) induced diabetic rat model. For this purpose, immune reactivity of melastatine-depended Transient Receptor Potential-2 (TRPM2) ion channels which have important effects on apoptotic process, were determined. Material and Methods: A total of 21 adult- Wistar Albino male rats were divided into 3 groups. The rats in the first group were used as control. The second group of rats were injected a single dose of 60 mg/kg STZ intraperitoneally, dissolved in phosphate-citrate buffer (pH:4.5), whereas third group of rats were the enalapril administered group (5 mg/kg/day oral for 10 weeks) following diabetes. All rats were decapitated at the end of 10 weeks. Renal tissue were placed into the 10% formaldehyde and embedded in paraffin blocks. The avidin-biotin-peroxidase method was applied into the 5 μm paraffin section to evaluate TRPM2 channels immune reactivity. The intensity of TRPM2 channels immune reactivity was scored semiquantitatively as follows: low +1, moderate +2, strong +3. Results: In light microscopic examination, TRPM2 immunoraectivity was found slightly increased (+1) in control group whereas, diabetic group showed widespread and intensive immune reactivity (+3). Treatment group was expressed moderate (+2) TRPM2 channels. Conclusion: The results of this study showed enalapril administration provided a protective effect against diabetic renal damage by reducing TRPM2 channel immune reactivity, in which thought to has a role in apoptotic process and diabetic nephropathies.