Sığır vebası virüsünün hemaglutinin proteinine karşı monoklonal antikorun üretimi ve karakterizasyonu

Production and characterization of monoclonal antibody to heamagglutinin protein of rinderpest virus

Özet

Bu çalışmada, sığır vebası virüsünün (RPV) hemaglutinin proteinine (H) karşı monoklonal antikor (MA)'ların üretimi ve bu antikorların karakterize edilmesi amaçlandı. Mevcut çalışmada, ilk olarak, RPV'nin aşı suşuyla (RBOK) immunize edilen farelerin dalak hücreleriyle myeloma hücreleri (FO) polietilen glikol-dimetil sülfoksid (PEG/DMSO) yardımıyla füzyon işlemi yapıldı. Hibrid hücrelerin seçimi hipoksantin-aminopterin-timidin (HAT) içeren hücre kültür vasatında gerçekleştirildi. Sığır vebası virüsuna karşı antikor salgılayan hibrid hücre kuyucuklarının seçimi enzime bağlı immunosorbent deneyi (ELISA) ile yapıldı. Limiting dilusyon işlemini takiben gerçekleştirilen sodyum dodesil sülfat-poliakrilamid jel elektroforez (SDS-PAGE) ve immunblotting ile H proteinine karşı antikor salgılayan klonlar belirlendi. Klonlara ait antikorların alt tipleri ve nötralizasyon etkileri gibi bazı özellikleri karakterize edildi. Bu çalışma ile, RPV virüsünün hemaglutinin proteinine karşı MA'ların üretilmesi ye bu antikorların karakterize edilmesi gerçekleştirilmiştir.

Abstract

Production and Characterization of Monoclonal Antibody to Heamagglutinin Protein of Rinderpest Virus In this study, production and characterization of monoclonal antibody (Mabs) to heamagglutinin protein of rinderpest virus (RPV) were aimed. In present study, initially, splenocytes from the mice immunized with RPV-RBOK and myeloma cell line (FO) were fused by polyethylene glycol-dimethyl sulfoxide (PEG/DMSO). For the selection of hybrid cell lines, the cell culture media containing hypoxanthine-aminopterin-thymidine (HAT) was used. An enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was utilized to select hybrid cell line producing antibodies against RPV. After limiting dilution procedure, sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and immunblotting were used to determine the specifity of anti-H Mab. These antibodies were characterized for certain properties such as sub-type and neutralization affect. With this study, production and characterization of monoclonal antibody (Mabs) to heamagglutinin protein of rinderpest virus (RPV) was carried out.