Sığır dalak doku arginazının bazı kinetik özellikleri

Özet

Bu çalışmada sığır dalak doku arginazının bazı kinetik özelliklerini incelenmiştir. Çalışmada kullanılan dalak dokuları Elazığ’daki Elkas kesimevinden temin edilmiştir. Arginaz aktivitesini ölçmede tiyosemikarbazid-diasetilmonoksim üre (TDMU) metodu kullanılmıştır. Protein Lowry ve arkadaşlarının metoduna göre ölçülmüştür. Preinkübasyon sıcaklığı, preinkübasyon süresi, inkübasyon süresi ve optimal pH’ nın sırasıyla $62 ^circ C$, 15 dakika, 10 dakika ve 9.7 olduğu tespit edilmiştir. Ayrıca sığır dalak doku arginazının çeşitli metal iyonlarına karşı duyarlılığı tespit edilmiş ve metal iyonları ($Mn^{+2}$, $Cu^{+2}$, $Mg^{+2}$, $Ba^{+2}$, $Fe^{+3}$, $Ag^{+2}$, $Cr^{+3}$, $Sn^{+2}$, $Hg^{+2}$, $Pb^{+2}$, $Co^{+2}$, $Ni^{+2}$, $Zn^{+2}$, $Cd^{+2}$, $Li^{+1}$, $K^{+1}$, $Al^{+3}$, $Mo^{+6}$, $Na^{+1}$ ve $Ca^{+2}$ ) içinde enzim aktivitesi üzerine en etkili metalin $Mn^{+2}$ olduğu bulunmuştur. Enzim 2 mM’ lık $MnCl_2$ konsantrasyonunda en yüksek aktiviteyi göstermiştir. Enzim aktivasyonu için $Mn^{+2}$ iyonlarının ve preinkübasyonun gerekli olduğu görülmüştür. $Pb^{+2}$ ve $Ag^{+2}$ iyonları varlığında enzim hiç aktivite göstermemiştir. Enzimin substrata olan ilgisi Michaelis -Menten grafiğine göre değerlendirilmiş ve Km değeri 5 mM olarak bulunmuştur.

Abstract

In this study, some kinetic properties of arginase in bovine spleen tissue were examined. The spleen tissues used in the present study were obtained from the Elkas sloughterhause in Elazıg. The thiosemicarbazide- diacetylmonoxime urea (TDMU) method was used to measure arginase activity. Protein was measured by the method of Lowry et al. Preincubation temperature, preincubation period, incubation period and optimal pH were determined to be $62^circ C$, 15 min, 10 min and 9.7 respectively. Furthermore, it was found that arginase in bovine spleen tissue was sensitive to different metal ions. It was found that the most effective was $Mn^{+2}$ from among $Mn^{+2}$, $Cu^{+2}$, $Mg^{+2}$, $Ba^{+2}$, $Fe^{+3}$, $Ag^{+2}$, $Cr^{+3}$, $Sn^{+2}$, $Hg^{+2}$, $Pb^{+2}$, $Co^{+2}$, $Ni^{+2}$, $Zn^{+2}$, $Cd^{+2}$, $Li^{+1}$, $K^{+1}$, $Al^{+3}$, $Mo^{+6}$, $Na^{+1}$ and $Ca^{+2}$ metal ions. Arginase showed the highest activity in a 2 mM MnCl2 concentration. Manganese ions and preincubation were necessary for the activation of the enzyme. The enzyme has no activity in presence of Pb and Ag ions. The relationship with the enzyme substrate was evaluated according to Michaelis- Menten and the Km value was 5 mM.