Farelerde amitraz zehirlenmesine ilişkin araştırmalar : 2. Akut zehirlenmelerde karaciğer malondialdehid düzeyleri

Investigation of amitraz toxicosis in mice : 2. Liver malondialdehyde levels in acute poisoning

Özet

Bu çalışma amitrazın lipid peroksidasyona yol açıp açmadığını ortaya koymak, lipid peroksidasyona sebep oluyorsa, bunun şiddetini belirlemek amacıyla yapıldı. Bunun için 156 erkek ve 156 dişi olmak üzere toplam 312 adet sağlıklı beyaz İngiliz ırkı fare kullanıldı. Kontrol grubu olarak (Grup 1) 12 erkek ve 12 dişi fare ayrıldıktan sonra, diğerleri önce her birinde 72 dişi ve 72 erkek bulunan 2 ana gruba (Grup 2 ve 3) ve bunlar da her birinde 12 dişi ve 12 erkek bulunan 12 alt gruba (2A, 2B, 2C, 2D, 2E, 2F ve 3A, 3B, 3C, 3D, 3E, 3F ) ayrıldı. İlaç olarak %97'lik amitraz teknik standartı ve 1 mi'sinde 120 mg amitraz içeren veteriner müstahzarı kullanıldı. Bunlar her fareye 0.3 mi miktarda verilecek şekilde dimetilsülfoksidle seyreltildi. İlaç çözeltileri mide sondası yardımıyla hayvanlara şu dozlarda verildi; 2A, 2B, 2C, 2D, 2E ve 2F grubuna teknik amitrazdan sırasıyla 500, 1000, 1500, 1800, 2200 ve 2500 mg/kg amitraz, 3A, 3B, 3C, 3D, 3E ve 3F grubuna veteriner müstahzarından sırasıyla 50, 100, 250, 500, 750 ve 1000 mg/kg amitraz. İlaç uygulamasını takiben bir hafta beklendi. Bu süre içerisinde ölen farelerden hemen, ölmeyenler ve kontrol grubundakilerden ise eter ile ötanazi uygulandıktan sonra karaciğerleri alındı. Karaciğer malondialdehid (MDA) düzeyleri spektrofotometrik yöntemle tayin edildi. İlaç uygulaması yapılmayan kontrol grubunda karaciğer MDA düzeyleri erkeklerde 58.84+22.03 ve dişilerde 53.67±20.73 nmol/g olurken, bu değerler ağızdan değişik dozlarda teknik amitraz standartı verilen 2A, 2B, 2C, 2D, 2E ve 2F grubundaki erkeklerde sırasıyla 161.6±56.0, 335.92i94.45, 171.76±18.85, 228.7±63.09, 52.62±16.14, 54.48+7.37 ve dişilerde ise yine sırasıyla 167.49+56.17, 305.54+96.42, 308.66±100.18, 279.39±126.19, 63.43±36.56, 51.07±8.63 nmol/g olarak ölçülmüştür. Veteriner müstahzarı verilmesiyle ölen veya öldürülen farelerdeki karaciğer MDA düzeyleri de belirlenmiştir. Böylece, değişik dozlarda amitraz verilen 3A, 3B, 3C, 3D, 3E ve 3F grubundaki erkeklerde sırasıyla 62.60+6.85, 85.49±14.5, 87.64±11.1, 89.49+23.0, 85.25±15.66, 61.42±16.14 ve dişilerde yine sırasıyle 55.41±8.18, 80.23±11.42, 84.06±15.19, 88.3+29.70, 83.55+20.06, 50.80±13.48 nmol/g MDA ölçülmüştür. Bu bulgular amitraz ile zehirlenmede şiddetli hücre zarı hasarı olacağını ve amitrazın oksidatif stres nedeniyle karaciğer bozukluğu yapabileceği sonucunu ortaya çıkarmıştır.

Abstract

This study has been carried out for determining whether amitraz causes lipid peroxidation or not, and to determine the degree of it. Totally 312 healthy white England strain mice, 156 of which female and 156 of which male were used for this purpose. After having been divided of 12 male and 12 female mice as control group (Group 1), the remaining mice were first separated into 2 main groups (Groups 2 and 3) consisting of 72 male and 72 female mice and then these main groups were further separated into 12 sub groups (2A, 2B, 2C, 2D, 2E, 2F, and 3A, 3B, 3C, 3D, 3E, 3F) consisting of 12 male and 12 female mice. 97% technical standard of amitraz and veterinary speciality (120 mg amitraz/ml) were used as test agents. These were diluted with dimethyl sulfoxide so as to be given in the amount of 0.3 ml into each mouse. The solutions were given to mice by gavage in the following dosages: 500, 1000, 1500, 1800, 2200 and 2500 mg/kg amitraz of technical amitraz to the groups of 2A, 2B, 2C, 2D, 2E and 2F respectively, and 50, 100, 250, 500, 750 and 1000 mg/kg amitraz of veterinary speciality to the groups of 3A, 3B, 3C, 3D, 3E and 3F, respectively. Following the application of medicines, a period of a week has been waited. Livers of mice dying during this period were taken immediately, and the livers of the others and of the mice in the control group were taken after they have been killed with ether. Liver malondialdehyde (MDA) levels were determined by spectrophotometric method. While the liver MDA levels of the control group (which were not applied any medicine) were 58.84+22.03 nmol/g for the male mice and 53.67±20.73 nmol/gfor the female mice, the values for the mice in groups 2A, 2B, 2C, 2D, 2E and 2F which were given technical amitraz standard at different dosages orally, were measured as 161.6+56.0, 335.92+94.45, 171.76±18.85, 228.7+63.09, 52.62+16.14 and 54.48+7.37 nmol/g respectively for the male mice, and 167.49+56.17, 305.54+96.42, 308.66+100.18, 279.39±126.19, 63.43+36.56 and 51.07±8.63 nmol/g respectively for the female mice. The liver MDA levels of the mice died or killed by being given veterinary speciality, were also determined. Thus, the MDA levels of the mice in groups 3A, 3B, 3C, 3D, 3E and 3F which were given different dosages of veterinary speciality, were measured as 62.60+6.85, 85.49+14.5, 87.64+11.1, 89.49+23.0, 85.25±15.66 and 61.42±16.14 nmol/g respectively for the male mice, and 55.41±8.18, 80.23±11.42, 84.06±15.19, 88.3+29.70, 83.55+20.06 and 50.80+13.48 nmol/g respectively for the female mice. These results indicate that severe damage would occur to cell membrane in amitraz poisoning, and due to oxidative stress, amitraz would cause liver deformation.