Minikolon tekniği ile aflatoksin analizi

Özet

Bu çalışmanın amacı, yem ve yem hammaddelerinde mikotoksin analizinde yarı-kalitatif bir yöntem olarak kullanılan ıninikolon tekniğinin laboratuarımıza uyarlanması ve tekniğin duyarlılık limitlerinin araştırılmasıdır. Bu amaçla 10'u hammadde ve 12'si de karma yemden oluşan toplam 22 yem örneği kullanıldı. Her yem örneğine sırasıyla 10 ppb, 20 ppb, 50 ppb ve 100 ppb düzeyinde olacak şekilde aflatoksin ilave edildi. Ekstraksiyon işleminden sonra yoğunlaştırılmış olan ekstrakt, önceden hazırlanmış kolonlara aktarıldı. Ekstrakt ve yıkama solüsyonu tamamen geçtikten sonra UV ışığında mavi ya da yeşil floresans oluşumu yönünden incelendi. Florisil tabakadaki mavi flbresan pozitif olarak kabul edildi. Doğrulama testi olarak da aynı kolonlardan sülfürik asit (suda %25'lik) geçirildi ve oluşan mavi rengin aflatoksinler için karakteristik olan sarı renge dönüştüğü görüldü. Elde edilen sonuçlar ıninikolon tekniği ile yem ve yem hammaddelerindeki 10 ppb'lik aflatoksin yoğunluğunun ölçülebileceğini ve bu yöntemin rutin analizlerde, tarama niteliğinde olacak şekilde saha şartlarında kullanılabileceğini gösterdi.

Abstract

The aim of this study is to adapt minicolumn technique, that is used as a qualitative method for mycotoxins analysis, to our laboratory, and also determine the detection limits of this method. For this aim 10 feedstuff and 12 mixed feed; totally 22 feed samples were used. Ten ppb, 20 ppb, 50 ppb and 100 ppb aflatoxins were added to each feed samples, respectively. After extraction of these samples, the extracts were condensed and transferred to the minicolumn. After the extract and the developing solution were passed through the column, results were evaluated under UV light to observe blue or green fluorescence. Blue fluorescence in florisil layer evaluated as positive. So as to confirm the test, sulfuric acid (24%, in water) was added to the columns and it was observed that the blue color was turned to yellow, which characterize for aflatoxins. Results show that the 10 ppb aflatoxin can be detected in the feedstuff and mixed feed with minicolumn technique and this method can be used in routine analysis and in practical.