Dergiler / Anadolu Kliniği Tıp Bilimleri Dergisi / 2020 / Cilt: 25 - Sayı: 1
Normozoospermik İnfertil Hastaların İntrauterin İnseminasyon Tedavisi İçin İdeal Bir Sperm Seçim Yöntemi
- Sayfa
- 19–26
- DOI
- —
Özet
Amaç: Bu çalışmada normozoospermik infertil hastaların (NİH) intrauterin inseminasyon tedavisi için ideal sperm seçim yöntemini belirlemek amacıyla geleneksel yüzdürme ve yoğunluk gradyanlı santrifüjleme teknikleri ve yeni nanoteknoloji bazlı mikroakışkan çip yöntemi ile seçilen spermlerin DNA bütünlüğü değerlendirilmiştir. Gereç ve Yöntemler: Yirmi hastadan toplanan semen örnekleri dört eşit parçaya bölündü. Kontrol, yoğunluk gradyanlı santrifüjleme, yüzdürme ve mikroakışkan çip (MÇ) grupları oluşturuldu ve bu dört gruba ait işlem görmemiş (kontrol) ve görmüş (diğer) sperm örnekleri DNA bütünlüğü açısından incelendi. Sperm kromatin yoğunlaşma kusurlarını ve DNA kırıklarını değerlendirmek için asidik anilin mavisi ve TUNEL boyaması kullanıldı. Reaktif oksijen türevi seviyelerini tespit etmek için akış sitometrisi ile diklorofloresan diasetat kullanıldı. Bulgular: MÇ yöntemiyle seçilen spermlerde kromatin kondensasyon defekti, DNA fragmantasyonu ve reaktif oksijen türevi değerleri, geleneksel yöntemlerle seçilen spermlere göre anlamlı şekilde düşük bulundu (p
Abstract
Aim: In this study, we evaluated the DNA integrity of sperms selected by using the conventionalswim-up and density gradient centrifugation techniques and the new nanotechnology-based microfluidic chip method in order to determine the ideal sperm selection method for the intrauterineinsemination treatment of normozoospermic infertile patients (NIPs).Materials and Methods: Semen samples obtained from 20 patients were divided into four equalfractions. Control, density gradient centrifugation, swim-up, and microfluidic chip (MC) groupswere created, and the untreated (control) and treated (other) sperm samples from the four groupswere examined for DNA integrity. Acidic aniline blue staining and the TUNEL method were usedrespectively for evaluating sperm chromatin condensation defects and DNA fragmentation. Dichlorofluorescein diacetate and flow cytometry were used to determine the reactive oxygen specieslevels.Results: We measured significantly lower values of chromatin condensation defects, DNA fragmentation and reactive oxygen species for the sperms selected with the MC method, compared to thesperms selected with the conventional methods (p