Dergiler / Adıyaman Üniversitesi Fen Bilimleri Dergisi / 2021 / Cilt: 11 - Sayı: 1
Devekuşu Yumurta Akı ve Sarısı Glikoproteomlarından İzole Edilmiş N-glikanların HPLC-HILIC-FLD-MS/MS ile Derinlemesine Profillenmesi
- Sayfa
- 191–204
- DOI
- —
Özet
Protein glikozilasyonu önemli bir post-translasyonel modifikasyondur ve kritik hücresel olayları kontrol eder. Yumurta akı ve sarısından elde edilen N-glikozile proteinlerin çeşitli hücresel yolaklarda önemli roller oynadığı bilinmektedir. Bu fonksiyonları anlamak için glikoproteomlara ait N-glikan yapılarının karakterizasyonu gereklidir. Bu nedenle, bu çalışma devekuşu yumurtası akı ve yumurta sarısı glikoproteomlarının N-glikan profillerini karakterize etmeyi amaçlamaktadır. Çalışmada, devekuşu yumurta akı ve sarısı glikoproteomlarından Nglikanlar enzimatik bir süreçle salındı ve bir prokainamid etiketi ile etiketlendi. Örnekler, HPLCHILIC-FLD-MS/MS (yüksek performanslı hidrofilik etkileşim sıvı kromatografisi ile floresans ve ikili kütle spektrometrik dedeksiyon) ile analiz edildi. Devekuşu yumurta akı ve sarısı glikoproteomlarından tespit edilen N-glikan sayıları sırasıyla 39 ve 36 olarak bulundu. Devekuşu yumurtası akı glikoproteomunun N-glikanlarının yüksek oranda galaktozile olduğu (%96,64) belirlendi. Ek olarak, bisekte N-glikanların devekuşu yumurtası akı glikoproteomunda (%91.72) devekuşu yumurta sarısı glikoproteomuna (%6.74) kıyasla bol miktarda bulunmuştur. Devekuşu yumurta sarısı glikoproteomunda yüksek mannozlu N-glikanların bolluğu (%55.84) devekuşu yumurta sarısı glikoproteomundan (%2.67) önemli ölçüde daha yüksek olduğu belirlendi. Devekuşu yumurtası akı ve sarısı glikoproteomlarına ait N-glikanların fukozlanma oranı sırasıyla %4.52 ve %0.95 olarak tespit edilmiştir. Elde edilen veriler, devekuşu yumurtası akı ve sarısı glikoproteomlarının N-glikan profillerinin önemli ölçüde farklılık gösterdiğini göstermiştir.
Abstract
Protein glycosylation is an essential post-translational modification and modulates criticalcellular events. It is known that N-glycosylated proteins from egg white and yolk are playedcrucial roles in various cellular pathways. Characterization of N-glycan structures ofglycoproteomes is required to understand these functions. Therefore, this study is aimed tocharacterize the N-glycan profiles of ostrich egg white and yolk glycoproteomes. In the study, Nglycans were released from ostrich egg white and yolk glycoproteomes by an enzymatical processand labeled with a procainamide tag. Samples were analyzed by HPLC-HILIC-FLD-MS/MS(high-performance hydrophilic interaction liquid chromatography with fluorescence and tandemmass spectrometric detection). The number of detected N-glycans obtained from ostrich egg whiteand yolk glycoproteomes was found to be 39 and 36, respectively. It was determined that Nglycans of ostrich egg white glycoproteome were highly galactosylated (96.64%). In addition,bisecting N-glycans were abundant in ostrich egg white glycoproteome (91.72%) compared toostrich egg yolk glycoproteome (6.74%). The abundance of high-mannose N-glycans wasdramatically higher in the ostrich egg yolk glycoproteome (55.84%) than the ostrich egg yolkglycoproteome (2.67%). The fucosylation ratio of N-glycans belonging to ostrich egg white andyolk glycoproteomes was detected to be 4.52% and 0.95%, respectively. The obtained data showed that N-glycan profiles of ostrich egg white and yolk glycoproteomes differedsignificantly.