Dergiler / Türk Göğüs Kalp Damar Cerrahisi Dergisi / 2019 / Cilt: 27 - Sayı: 2
Osthol sıçanları miyokardiyal iskemi/reperfüzyona karşı korumak için miR-30a’yı azaltarak düzenler ve otofajiyi destekler
- Sayfa
- 178–184
- DOI
- —
Özet
Amaç: Bu çalışmada bir miyokardiyal iskemi/reperfüzyon hasarı modelinde osthol tedavisi sonrası miR-30a ekspresyonu ve miyokardiyal otofajideki değişiklikler araştırıldı. Çalışma planı: Otuz erkek Wistar sıçanı (ağırlık, 170-220 g, yaş 8 hafta) randomize şekilde kontrol (taklit) grubu, iskemi/ reperfüzyon (model) grubu ve iskemi/reperfüzyon + osthol tedavi sonrası (osthol) grubu olmak üzere üç gruba ayrıldı. Miyokardiyal kollajen değişiklilerini saptamak için Masson'un trikrom boyaması kullanıldı. İskemik alandaki apoptotik kardiyomiyositler terminal deoksinükleotidil transferaz aracılı dUTP (2'-deoxyuridine 5'-triphosphate) çentik-uç etiketleme testi ile in situ etiketlendi. Miyokardiyal dokuda LC3b (light chain 3 beta) ve Beclin-1 otofaji belirteçlerinin düzeyleri western blotlama ile saptandı. miR-30a ekspresyonu kantitatif ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu ile saptandı. Bulgular: İskemi/reperfüzyon, taklit grubuna kıyasla kollajen içeriklerini anlamlı şekilde artırdı. Osthol, iskemi/reperfüzyonun artırdığı kollajen içeriklerini anlamlı şekilde engelledi. Osthol, iskemi/reperfüzyonun artırdığı miyokardiyal fibrozu, miyokardiyal şişkinliği, nekrozu ve miyokardiyal atrofiyi engelledi. Osthol, miyokardiyal hücrelerde iskemi/reperfüzyonun artırdığı apoptozu da anlamlı şekilde engelledi. Ayrıca, LC3b-I’in LC3b-II’ye dönüşümü ve Beclin-1 ekspresyonu iskemi/reperfüzyon tarafından anlamlı şekilde engellendi. Osthol tedavisi iskemi/reperfüzyon sıçanlarında LC3b-I’in LC3b-II’ye dönüşümünü ve Beclin-1 ekspresyonunu anlamlı şekilde artırdı. Son olarak, miR-30a ekspresyonu iskemi/reperfüzyon sıçanlarında anlamlı şekilde artarken osthol, miR-30a ekspresyonunu baskıladı. Sonuç: Osthol otofajiyi destekleyerek miyokardiyal iskemi/ reperfüzyon hasarını azalttı. Osthol miR-30a ekspresyonunu azaltarak düzenleyerek otofaji sırasında miyokardı korur.
Abstract
Background: This study aims to investigate the changes inmiR-30a expression and myocardial autophagy following ostholetreatment in a myocardial ischemia/reperfusion injury model.Methods: Thirty male Wistar rats (weighing 170 to 220 g, aged8 weeks) were randomly divided into three groups as control(sham) group, ischemia/reperfusion (model) group, and ischemia/reperfusion + osthole post-treatment (osthole) group. Masson’strichrome staining was used to detect myocardial collagen changes.Apoptotic cardiomyocytes in the ischemic area were labeledin situ by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP(2'-deoxyuridine 5'-triphosphate) nick end labeling assay. Levelsof autophagy markers light chain 3 beta (LC3b) and Beclin-1 inmyocardial tissue were detected by western blotting. Expressionof miR-30a was detected by quantitative reverse transcriptionpolymerasechain reaction.Results: Compared with the sham group, ischemia/reperfusionsignificantly increased collagen contents. Osthole significantlyinhibited the ischemia/reperfusion-increased collagen contents.Osthole inhibited the ischemia/reperfusion-increased myocardialfibrosis, myocardial swelling, necrosis, and myocardial atrophy.Osthole also significantly inhibited the ischemia/reperfusionincreasedapoptosis of myocardial cells. Moreover, the conversionof LC3b-I to LC3b-II and the Beclin-1 expression were significantlyinhibited by ischemia/reperfusion. Osthole treatment significantlyincreased the conversion of LC3b-I to LC3b-II and Beclin-1expression in ischemia/reperfusion rats. Finally, the expression ofmiR-30a was significantly increased in ischemia/reperfusion rats,while Osthole suppressed the expression of miR-30a.Conclusion: Osthole promoted autophagy, thereby alleviatingmyocardial ischemia/reperfusion injury. Osthole protects themyocardium during autophagy by down-regulating miR-30a expression.