Evaluation of four different HPLC devices for hemoglobinopathy screening

Müjgan ERCAN KARADAĞ,Emiş Deniz AKBULUT,Esra FIRAT OĞUZ,Fatma Meriç YILMAZ,Esin SAVCI,Saadet ÇELİK,Gülsüm ABUŞOĞLU,Muhittin A. SERDAR

Özet

Objective: Hemoglobinopathies are a common public health problem in Turkey. In the screening of these disor ders in population, cation-exchange high performance liquid chromatography (HPLC) is accepted as the gold standard method. In this study, the aim was to assess four different HPLC devices used in hemoglobinopathy screening. Materials and methods: A total of 58 blood samples were analyzed with four different HPLC methods (Bio-Rad variant II, Agilent 1100, Tosoh G8 and Trinity Ultra2 trademarks). Results: The comparison study demonstrated a good correlation between the results of each HPLC analyzer and the reference value obtained by averaging all the $HbA_2$ results belonging to the methods tested in the study [ (Tosoh G8 (r=0.988), Bio-Rad variant II (r=0.993), Agilent 1100 (r=0.98) and Trinity Ultra2 (r=0.992) ]. $HbA_2$ deter mination in the presence of HbE was interfered in both Bio Rad variant II and Tosoh G8. Conclusion: The analyzers were found to have compatible $HbA_2$ results but with accompanying different degrees of proportional and systematic biases. HPLC analyzers may be affected by different hemoglobin variants at different $HbA_2$ concentrations, which is an important point to take into consideration during the evaluation of HbA2 results in thalassemia screening.

Abstract

Amaç: Hemoglobinopatiler Türkiye’de yaygın bir halk sağlığı sorunudur. Bu bozuklukların popülasyon tar amasında, katyon değişimi HPLC, altın standart yöntem olarak Kabul edilir. Bu çalışmada hemoglobinopati tar amasında kullanılan dört farklı HPLC cihazının değerlen dirilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntemler: Toplam 58 kan örneği dört farklı HPLC (Bio-Rad variant II, Agilent 1100, Tosoh G8 ve Trinity Ultra2 marka) cihazı ile analiz edildi Bulgular: Karşılaştırma çalışmasında, her bir HPLC ana lizörünün sonuçları ile çalışmada değerlendirilen metot lara ait tüm $HbA_2$ sonuçlarının ortalaması alınarak elde edilen referans değer arasında iyi bir korelasyon olduğunu göstermiştir [ (Tosoh G8 (r=0.988), Bio-Rad variant II (r=0.993), Agilent 1100 (r=0.98) ve Trinity Ultra2 (r=0.992) ]. HbE varlığının hem Bio-Rad Varyant II hem de Tosoh G8 cihazlarının $HbA_2$ sonuçlarında interferansa neden olduğu gözlenmiştir. Sonuç: Eşlik eden farklı derecelerde orantılı ve siste matik biasla birlikte analizörlerin uyumlu $HbA_2$ sonu çlarına sahip oldukları gösterilmiştir. Talasemi taramaları değerlendirilirken, kullanılan HPLC anali zörlerinin farklı $HbA_2$ konsantrasyonlarında farklı he moglobin varyantlarının varlığından etkilenebileceği göz önünde bulundurulmalıdır.