Quantitative Determination of Related Substances in Formoterol Fumarate and Tiotropium in Tiomate Transcaps® Dry Powder Inhaler

Tiomate Transcaps® Kuru Toz İnhalerde Formoterol Fumarat ve Tiotropiumdaki İlgili Maddelerin Kantitatif Tayini

Özet

Objectives: Tiotropium (TIO) and formoterol fumarate (FF) combination in dry powder inhaler (DPI) dosage form used for treating asthma, bronchospasm, chronic bronchitis, emphysema and chronic obstructive pulmonary diseases. Aim to develop an analytical method for estimating emerging and advancing dry powder inhaler combination toward enhanced therapeutics for the estimation of related substances but for this it is foremost to have a sensitive, simple, robust and validated method therefore, a new reverse phase-high performance liquid chromatography (HPLC) method has been developed for the determination of related substances in FF and TIO DPI. Materials and Methods: The analytical method was performed on schimadzu HPLC with a quaternary pump, the separation achieved using BDS Hypersil C18 (250×4.6 mm, 5 μm) column with mobile phase consisting of sodium phosphate buffer pH 3.2 and acetonitrile 1.0 mL min-1 flow rate in the gradient elution. Diluent consists of a mixture of buffer pH 3.2 and acetonitrile in the ratio of (70:30) %v/v. 30°C column temperature and photodiode-array detection detector at a wavelength 240 nm. The run time was 50 min. The Retention time of FF and TIO was found to be at 7.8 and 10.3 min respectively. Results: Both the analyte peaks were found to be free from interference. The method was validated as per the International Council on Harmonisation guidelines, the linearity was performed on 0.015 to 1.089 ppm for TIO and 0.01 to 0.728 ppm for FF concentration with correlation coefficient of 1,000. The precision and accuracy were also performed at the limit of quantification level were within the limits. Forced degradation study was also conducted. Conclusion: The recommended method for the related substance determination of FF and TIO is simple, selective, specific and precise. It also demonstrates the study of the degradation pattern. Moreover, the above developed related substance analytical method was applied to the bulk analysis and pharmaceutical dosage form for routine analysis and stability study

Abstract

Amaç: Kuru toz inhaler (KTİ) dozaj formunda olan tiotropium (TIO) ve formoterol fumarat (FF) kombinasyonu, astım, bronkospazm, kronik bronşit, amfizem ve kronik obstrüktif akciğer hastalıklarının tedavisinde kullanılmaktadır. Amaç, kuru toz inhaler kombinasyonları olarak ortaya çıkan ve gelişmekte olan dozaj formlarındaki ilgili maddelerin tespitine yönelik analitik bir yöntem geliştirmektir. KTİ’de bulunan FF, TIO ve ilgili maddelerin belirlenebilmesi için öncelikle hassas, basit, sağlam ve valide edilmiş yeni bir ters faz yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) yöntemi geliştirilmiştir. Gereç ve Yöntemler: Analitik yöntem, dörtlü pompalı Shimadzu HPLC cihazı ile gerçekleştirilmiştir; ayırım BDS Hypersil C18 (250x4,6 mm, 5 μm) kolonu, 1,0 mL dk-1 akış hızında sodyum fosfat tamponu pH 3,2 ve asetonitrilden oluşan mobil faz kullanılarak gradient elüsyon ile sağlanmıştır. Mobil faz pH 3,2 tampon ve asetonitril karışımından (70:30; % h/h) oluşmaktadır. Analiz, kolon sıcaklığı 30°C, fotodiyot dizi detektörü 240 nm dalga boyunda gerçekleştirilmiştir. Analiz süresi 50 dk olmuştur. FF ve TIO’nun retansiyon zamanları sırasıyla 7,8 ve 10,3 dk olarak bulunmuştur. Bulgular: Her iki analitin herhangi bir girişimde bulunmadığı saptanmıştır. Yöntem, Uluslararası Harmonizasyon Konseyi yönergelerine göre valide edilmiştir; doğrusallık TIO için 0,015-1,089 ppm ve FF için 0,01-0,728 ppm konsantrasyon aralıklarında, 1,000 korelasyon katsayısı ilegerçekleştirilmiştir. Kesinlik ve doğruluk, tayin limiti seviyesinde gerçekleştirilmiş, sınırlar içinde bulunmuştur. Zorlamalı bozunma çalışması da gerçekleştirilmiştir. Sonuç: FF, TIO ve ilgili maddelerin tespiti için önerilen yöntem basit, seçici, spesifik ve kesindir. Aynı zamanda zorlamalı degradasyon çalışmasını da göstermektedir. Ayrıca, geliştirilen analitik yöntem yığın analizi ve farmasötik dozaj formunun rutin analizlerinde ve stabilite çalışmasına uygulanmıştır.