Inhibition of MicroRNA miR-92a inhibits cell proliferation in human acute promyelocytic leukemia

MikroRNA miR-92a inhibisyonu insan akut promyelositik lösemide hücre proliferasyonunu inhibe eder

Özet

Amaç: MikroRNA (miRNA) lar endojen protein kodlamayan RNA’lar, 19-25 nükleotit uzunlukta olup mRNA’ların önemli bir çoğunluğunda post-transkripsiyonel gen ekspresyon regülasyonunda yer almaktadırlar. Çoğu tümörde, farklı miRNA’ların up- veya down-regülasyonu rapor edilmiştir. Akut myeloid lösemide miR-92a’nın up-regülasyonu insan in vitro çalışmalarında bildirilmiştir. Bu çalışmada esas olarak, akut promyelositik lösemi (APL) de miR-92a inhibisyonunun etkisinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntemler: Akut Promyelositik Lösemi (APL) hücre dizisinde (HL-60) locked nükleik asit (LNA) antagomir kullanarak miR-92a’nın inhibisyonunu gerçekleştirdik. LNA-anti-miR92a transfeksiyonu sonrası farklı zamanlarda, miR-92a kantitasyonu ve hücre viabilitesi qRT-Real-Time-polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ve MTT testleri ile değerlendirildi. ANOVA testi kullanılarak veriler işlendi. Bulgular: APL hücre dizisinde (HL-60) LNA antagomir ile miR-92a down regülasyonu APL’de hücre viabilitesini belirgin ölçüde azalttı. Post-transfeksiyon sonrası 72. saatte, LNA-anti-miR transfekte hücreler muamele edilmemiş hücrelerin %50 sinden azı olduğunda, hücre viabilitesi kademeli olarak zaman içinde azaldı. LNA-anti-miR ve kontrol grupları arasında hücre canlılığı açısından farklılık istatistiksel olarak anlamlıydı (p<0.024). Sonuç: Bulgularımıza göre, miR-92a inhibisyonunun APL tedavisi için yeni bir potansiyel terapötik yaklaşım olabileceği sonucuna varılmıştır.

Abstract

Objective: MicroRNAs (miRNAs) are endogenous non-coding RNAs, 19-25 nucleotides in length involved in post- transcriptional regulation of gene expression in a considerable majority of mRNAs. In many tumors, up- or down-regulation of different miRNAs has been reported. In acute myeloid leukemia up-regulation of miR-92a has been reported in humans in vitro studies. In this study it is mainly aimed to assess the effect of inhibition of miR-92a in viability of acute promyelocytic leukemia (APL). Materials and Methods: We performed inhibition of miR-92a in an acute promyelocytic leukemia (APL) cell line (HL-60) using locked nucleic acid (LNA) antagomir. At different time points after LNA-anti-miR92a transfection, miR-92a quantitation and cell viability were assessed by qRT-real-time-polymerase chain reaction (PCR) and MTT assays. The data was processed using the ANOVA test. Results: Down-regulation of miR-92a in APL cell line (HL-60) by LNA antagomir extensively decreased cell viability in APL. Cell viability gradually decreased over time as the viability of LNA-anti-miR transfected cells was less than 50% of untreated cells at 72 h post-transfection. The difference of cell viability between LNA-anti-miR and control groups was statistically significant (p<0.024). Conclusion: Based on our findings, it is concluded that inhibition of miR-92a may represent a potential novel therapeutic approach for treatment of APL.