The Experimental Study of miRNA in Pituitary Adenomas

Özet

AMAÇ: Pitüiter adenomlarda (hem çalışmayan hem gonadotropin salan) ve normal hipofiz bezlerinde diferansiyel miRNA ekspresyonunu araştırdık. YÖNTEM ve GEREÇLER: RNA pitüiter adenomlardan (10 çalışmayan ve 10 gonadotropin salan) ve iki normal pitüiter doku örneğinden ekstrakte edilip saflaştırıldı. Örnekler miRNA mikroarray ile analiz edildi. Gen ekspresyonu SYBR GREEN I ile gerçek zamanlı RT-PCR kullanılarak ölçüldü. BULGULAR: Çalışmayan pitüiter adenomlarda 25 miRNA geni yukarı doğru düzenlenmişti (altısı 5 kattan fazla) ve 15i aşağı düzenlenmişti (altısı 10 kattan fazla). miR-124a en çok yukarı düzenlenmiş gendi (38,58-kat) ve miR-31 en çok aşağı düzenlenmiş gendi (21,5-kat). Gonadotropin salan pitüiter adenomlarda 16 miRNA geni yukarı doğru düzenlenmişti (altısı 4 kattan fazla) ve 13ü aşağı düzenlenmişti (yedisi 10 kattan fazla). miR-10b en çok yukarı düzenlenmiş gendi (48,73-kat) ve miR-503 en çok aşağı düzenlenmiş gendi (39,8-kat). Beş gen her iki alt tipte yukarı düzenlenmişti: miR-523, miR-10b, miR-520b, miR-422a ve miR-422b. RT-PCR sonuçları gen çiplerininkiyle tutarlıydı. SONUÇ: Çalışmayan ve gonadotropin salan pitüiter adenomların miRNA ekspresyon haritalarını oluşturduk. En kuvvetli ayırıcı bir şekilde ekspresyon görülen genler, çalışmayan pitüiter adenomlarda miR-124a ve miR-31 ve gonadotropin salan pitüiter adenomlarda miR-10b ve miR-503 oldu.

Abstract

AIM: We investigated the differential miRNA expression in pituitary adenomas (both non-functioning and gonadotropin-secreting) and normal pituitaries. MATERIAL and METHODS: RNA was extracted and purified from pituitary adenomas (10 non-functioning and 10 gonadotropin-secreting) and from two normal pituitary tissue samples. The samples were analyzed by miRNA microarray. Gene expression was measured using real- time RT-PCR with SYBR GREEN I. results: In non-functioning pituitary adenomas, 25 miRNA genes were up-regulated (six by over 5-fold) and 15 were down-regulated (six by more than 10-fold). miR-124a was the most up-regulated gene (38.58-fold), and miR-31 the most down-regulated gene (21.5-fold). In gonadotropin-secreting pituitary adenomas, 16 miRNA genes were up-regulated (six by over 4-fold) and 13 were down-regulated (seven by more than 10-fold). miR-10b was the most up-regulated gene (48.73-fold), and miR-503 the most down-regulated gene (39.8-fold). Five genes were up-regulated in both subtypes: miR-523, miR-10b, miR-520b, miR-422a, and miR-422b. The RT-PCR results were consistent with those of the gene chips. CONCLUSION: We established miRNA expression maps of non-functioning and gonadotropin-secreting pituitary adenomas. The most strongly differentially expressed genes were miR-124a and miR-31 in non-functioning pituitary adenomas, and miR-10b and miR-503 in gonadotropin-secreting pituitary adenomas.