Development and Validation of a High-performance Liquid Chromatography–Diode-array Detection Method for the Determination of Eight Phenolic Constituents in Extracts of Different Wine Species

Çeşitli Şarap Örneklerinde Sekiz Fenolik İçeriğin Tayini için Bir HPLC-DAD Yönteminin Geliştirilmesi ve Geçerli Kılınması

Ebru TÜRKÖZ ACAR,Mehmet Engin CELEP,Mohammad CHAREHSAZ,Gülşah Selin AKYÜZ,Erdem YEŞİLADA

Özet

Objectives: A new HPLC method was developed and validated for the determination of some phenolic compounds; gallic acid, chlorogenic acid,epigallocatechin, caffeic acid, vanillin, p-coumaric acid, rutin, and quercetin in some local wine and fruit wine samples.Materials and Methods: Analyses were performed on a Zorbax Eclipse C18 column (4.6 x 150 mm, 3.5-µm particle size) using a gradient system.Mobile phase A was a 10-mM phosphoric acid solution and mobile phase B was methanol using a flow rate of 1 mL/min. Phenolic components weremonitored using a DAD at three different wavelengths.Results: The developed and validated method was generally linear between the 1-100 ppm concentration range. Recovery values were obtained inthe range of 95-105% and repetitive. The method was successfully applied to investigate the phenolic profiles of different wine samples.Conclusion: As a result of the study, an accurate, sensitive and reliable HPLC-DAD method was developed. The method was successfully used todetermine the concentrations of antioxidant phenolic constituents from some local wine extracts.

Abstract

Amaç: Bu çalışmada amaç bazı yerel şarap ve meyve şarabı örneklerinde gallik asit, klorojenik asit, epigallokateşin, kafeik asit, vanilin, p-kumarik asit, rutin ve kersetin fenolik bileşiklerinin tayini için yeni bir HPLC yöntemi geliştirilmesi ve geçerli kılınmasıdır. Gereç ve Yöntemler: Analizler, gradyan sistem kullanılarak bir Zorbax Eclipse C18 kolon (4.6 x 150 mm, 3.5-µm partikül boyutlu) üzerinde yürütülmüştür. Akış hızının 1 mL/min olduğu sistemde hareketli faz A 10-mM fosforik asit ve hareketli faz B metanol olarak belirlenmiştir. Fenolik bileşikler, üç farklı dalga boyunda bir DAD kullanılarak izlenmiştir. Bulgular: Geliştirilen ve geçerli kılınan yöntemin 1-100 ppm derişim aralığında doğrusal cevap verdiği gözlenmiştir. Geri kazanım değerleri %95-105 değerleri arasındadır ve tekrarlanabilir sonuçlardır. Geliştirilen yöntem çeşitli şarap örneklerinde fenolik profili incelemek için uygulanmıştır. Sonuç: Yapılan çalışma sonucunda doğru, hassas ve güvenilir ölçüm yapan bir HPLC-DAD yöntemi geliştirilmiş ve şarap özütlerinde, şarabın antioksidan özellik göstermesini sağlayan fenolik maddelerin derişimlerini tayin etmek için başarıyla kullanılmıştır.