Dergiler / Turkish Journal of Pharmaceutical Sciences / 2013 / Cilt: 10 - Sayı: 3
Kırmızı yonca (Trifolium pratense L.)'nın İzoflavon İçeriğinin YPSK-UV Metodu ile Tayini ve In vitro Antioksidan Aktivitesi
- Sayfa
- 463–472
- DOI
- —
Özet
Bu çalışmada, Türkiye'nin farklı yerlerinden toplanan Trifolium pratense'nin (kırmızı yonca) iki varyetesinin, T. pratense L. var. pratense and T. pratense L. var. sativum Schreb., toprak üstü kısımlarından hazırlanan metanol ve asitle hidrolize edilmiş metanol ekstrelerinde dört izoflavonun, daidzein (D), genistein (G), formononetin (F) ve biokanin A (B), konsantrasyonları tayin edilmiştir. Kırmızı yonca içerisindeki bu izoflavonların tayini için bir ters faz YPSK-UV metodu geliştirildi. Kromatografik ayırım % 0.3 asetik asit ve metanol içeren bir gradient sistemin kullanıldığı ters faz bir kolonda, SupelcosilTM LC-18 (15 cm x 4.6 mm id, 5µm) gerçekleştirilmiştir. En yuksek total D, G, F ve B miktarları T. pratense var. pratense içerisinde sırasıyla % 0.0447, % 0.0115, % 0.0251 ve % 0.0039 olarak bulunmuştur. Bitki örneklerinin toprak üstü kısımlarının metanol ekstreleri antioksidan aktiviteleri bakımından da incelenmiştir. İncelenen ekstreler DPPH serbest radikal süpürücü, tiyobarbitürik asit ve troloks'a eşdeğer antioksidan kapasite tayinlerinde bazı antioksidan aktivitelere sahip bulunmuştur. Örneklerin fenolik madde içerikleri Folin-Ciocalteu reajanı kullanılarak belirlenmiştir.
Abstract
In this study, the methanol and acid hydrolyzed methanol extracts prepared from the aerial parts of two varieties of Trifolium pratense (red clover) collected from different parts of Turkey, namely T. pratense L. var. pratense and T. pratense L. var. sativum Schreb., have been analyzed to determine the concentrations of four isoflavones, daidzein (D), genistein (G), formononetin (F) and biochanin A (B). ARP-HPLC-UV method for the determination of these isoflavones in red clover was developed. Chromatographic separation was carried out by using a gradient system consisting of 0.3 % acetic acid and methanol on a reversed phase column, SupelcosilTM LC-18 (15 cm x 4.6 mm id, 5µm). The highest content of total D, G, F, and B were found as 0.0447, 0.0115, 0.0251 and 0.0039 % in T. pratense var. pratense, respectively. Antioxidant capacity of the methanol extracts of aerial parts of plant samples was also studied. Studied extracts were found to possess some antioxidant activities, as determined by the DPPH free radical scavenging test, thiobarbituric acid and trolox-equivalent antioxidant capacity assays. The phenolic contents of the samples were determined using Folin-Ciocalteu's reagent.