Validated high-performance liquid chromatographic method for the determination of lamotrigine in human plasma and saliva

İnsan plazmasında ve tükrügünde lamotrijinin saptanması için valide edilmiş bir yüksek performansh sıvı kromatografi (HPLC) yöntemi

Özet

Lamotrijin (LTG) igin basit, duyarh ve kesin bir yiiksek basıng sıvı kromatografsi yöntemi tammlanmistır. 5 y.m ACES C18 revers-faz kolon ve pH’sı 6.3 ’e ayarlanmis, 1 mL/dak akis debisinde metanol:asetonitril:0.01 M potasyum fosfat monobazik (30:15:55, h/h/h) mobil fazı kullamlarak iyi bir kromatografik ayırım başanlmistır. Kantitatif saptama 304 nm dalgaboyunda UV absorbansmin ölgulmesiyle gergekleştirilmiştir. Yöntem 0.1-6.2 pLg/mL derişim arahginda dogrulsaldır (determinasyon katsayısı, r2 = 0.999). LTG’nin plazma ve tükrukte ahkonma zamanlan sırasiyla 6.8 ve 6.2 dakikadır. Kantitatif saptama sınırı 0.10 pLg/mL’dir. Plazma ve tiikrükten geri elde edilme yüzdeleri sırasıyla %97’den 98 ’e ve %96’dan 105'e kadar değişmiştir. Plazma ve tükrükte % varyasyon katsayısı olarak ifade edilen günlerarası ve günigi kesinlik 0.26 He 6.8 arasında degişmiştir. Yöntemin, farmakokinetik gahsmalar igin ve LTG’nin tükruk ve plazma örneklerinde izlenmesi igin uygun olduğu gösterilmiştir.

Abstract

A simple, sensitive and precise high performance liquid chromatographic assay for lamotrigine (LTG) is described. Good chromatographic separation was achieved using a 5 μm ACE-5 C18 reverse-phase column and a mobile phase consisting of methanol:acetonitrile:0.01 M potassium phosphate monobasic (30:15:55, v/v/v) adjusted to pH 6.3 and delivered at a flow rate of 1 mL/min. Quantification was performed by measurement of the UV absorbance at a wavelenght of 304 nm. The method was linear in the range of 0.1-6.2 μg/mL with a coeffient of determination, (r2 = 0.999 ). The retention time of LTG was 6.8 and 6.2 min in plasma and saliva, respectively. The limit of quantification was 0.10 μg/mL. Recovery from plasma and saliva ranged from 97 to 98 and 96 to 105 %, respectively. Between-day and within day precision expressed as CV % in plasma and saliva were in the range of 0.26 to 6.8. The method was showed to be appropriate for pharmacokinetic (PK) studies and monitoring LTG in saliva and plasma samples.