Dergiler / Turkish Journal of Pharmaceutical Sciences / 2014 / Cilt: 11 - Sayı: 2

Trifolium longidentatum’un İzoflavonlarının YPSK-UV Metodu ile Kantitatif Tayini ve Antioksidan Aktivitesi

Quantitative Determination of Isoflavones by HPLC-UV Method and Antioxidant Activity of Trifolium longidentatum

Sayfa
185–194
DOI
—

Özet

Bu çalışmada, Trifolium longidentatum Náb?lek (Fabaceae) bitkisinin toprak üstü kısımlarındaki daidzein (D), genistein (G), formononetin (F) and biokanin A (B) olmak üzere dört izoflavonun içeriğiTers faz YPSK-UV metotu kullanılarak kantitatif olarak analiz edilmiştir. Kromatografik ayırım, metanol, asetat tamponu (pH=4.75) ve asetonitril mobil fazının Agilent Eclipse XDB-18 (15 cm x 4.6 mm i.d.) ters faz kolon üzerinde uygulandığı gradient bir sistem kullanılarak gerçekleştirilmiştir. T. longidentatum'un toprak üstü kısımlarındaki D, G, F ve B içerikleri sırasıyla % 0.0095, 0.0056, 0.0021 ve 0.0073 olarak tayin edilmiştir. Ayrıca bitkinin toprak üstü kısımlarından hazırlanan metanol ekstresinin antioksidan potansiyali DPPH radikal süpürücü aktivite, lipid peroksidasyon inhibisyon ve troloks'a eşdeğer antioksidan kapasite gibi çeşitli in vitro metotlarla incelenmiştir. Sonuç olarak, T. longidentatum'un metanol ekstresi incelenen metotlarda antioksidan aktivitelere sahip bulunmuştur. Ayrıca ekstrenin fenolik madde içeriği Folin-Ciocalteu reaktifi kullanılarak 53.98 ± 0.95 mg gallik asit/g ekstre olarak ölçülmüştür

Abstract

In this study, aerial parts of Trifolium longidentatum Nábĕlek (Fabaceae) were quantitatively analyzed for their content of four isoflavones, daidzein (D), genistein (G), formononetin (F) and biochanin A (B), by the use of developed RP-HPLC-UV method. The chromatographic separation was performed using a gradient system with a mobile phase of methanol, acetate buffer (pH=4.75) and acetonitrile with on the reversed phase column, Agilent Eclipse XDB-18 (15 cm x 4.6 mm i.d.). The contents of D, G, F and B in the aerial parts of T. longidentatum were determined as 0.0095, 0.0056, 0.0021 and 0.0073 %, respectively. Antioxidant potential of the methanol extract prepared from the aerial parts of the plant was also investigated with different in vitro methods, namely DPPH radical scavenging activity, lipid peroxidation inhibition and trolox equivalent antioxidant capacity assays. As a consequence, it was observed that the methanol extract of T. longidentatum had in vitro antioxidant activities in these methods. The phenolic content of the extract was also measured as 53.98 ± 0.95 mg gallic acid/g extract by the Folin-Ciocalteu's reagent.