An Investigation on the In Vitro Wound Healing Activity and Phytochemical Composition of Hypericum pseudolaeve N. Robson Growing in Turkey

Türkiye’de Yayılış Gösteren Hypericum pseudolaeve N. Robson Türünün In Vitro Yara İyileştirme Aktivitesi ve Fitokimyasal Kompozisyonu Üzerine Bir Araştırma

Özet

Objectives: The aim of this study was to investigate the in vitro wound healing effects of the methanolic and aqueous extracts of Hypericumpseudolaeve N. Robson obtained by two different methods as well as its cytotoxicity, antioxidant activity, and selected phytochemical constituents.Materials and Methods: Total phenolic and flavonoid contents were measured using spectrophotometry-based methods. The cytotoxic effects ofthe extracts on L929 mouse fibroblast cells were evaluated by and 2h-tetrazolium,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay.Moreover, migration and spreading of the treated fibroblast cells were assessed by cell scratch assay as an in vitro wound healing model. In addition,the chemical content of the species was determined by high pressure liquid chromatography (HPLC).Results: The results of the cytotoxicity assay indicated that the methanolic and aqueous extract did not have any cytotoxic effect on fibroblast cellsat concentrations up to 500 µg/mL. Fibroblast migration was significantly increased by 62 µg/mL concentration of the aqueous extracts comparedto the negative control. The extracts showed good antioxidant activity and 16 phytochemical compounds were detected by HPLC, with the highestamount for epicatechin.Conclusion: The results showed that Hypericum pseudolaeve extracts have wound healing potential and contain several important antioxidantphenolic compounds. This species deserves further investigation aiming to isolate and identify the active compounds.

Abstract

Amaç: Bu çalışmanın amacı, Hypericum pseudolaeve N. Robson türünün iki farklı yöntemle elde edilmiş metanolik ve su ekstrelerinin in vitro yara iyileştirici etkisi ile sitotoksisitesini, antioksidan aktivitesini ve seçilmiş fitokimyasallarını araştırmaktır. Gereç ve Yöntemler: Toplam fenolik ve flavonoit içerikleri spektrofotometri-temelli yöntemler kullanılarak ölçülmüştür. Ekstrelerin L929 fare fibroblast hücreleri üzerindeki sitotoksik etkileri 2h-tetrazolium,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide yöntemi ile değerlendirilmiştir. Ayrıca, uygulana yapılmış fibroblast hücrelerinin göçleri ve yayılmaları in vitro yara iyileşme modeli olarak kullanılan hücre çizik yöntemi ile değerlendirilmiştir. Ayrıca, türün kimyasal içeriği yüksek basınçlı sıvı kromatografisi (HPLC) ile belirlenmiştir. Bulgular: Sitotoksisite deneyinin sonuçları, metanolik ve sulu ekstrelerinin, 500 µg/mL konsantrasyona kadar kullanıldığında fibroblast hücreleri üzerinde herhangi bir sitotoksik etkiye sahip olmadığını göstermiştir. Fibroblast göçü 62 µg/mL konsantrasyonunda sulu ekstreler uygulandığında negatif kontrole göre anlamlı derecede artış göstermiştir. Ekstreler iyi derecede antioksidan aktivite göstermiştir ve HPLC analizi ile içerinde en yüksek düzeyde epikateşin olmak üzere 16 fitokimysal bileşik tespit edilmiştir. Sonuç: Sonuçlar Hypericum pseudolaeve ekstrelerinin, yara iyileşme potansiyeline sahip olduğunu ve çeşitli önemli antioksidan fenolik bileşikler içerdiğini göstermiştir. Bu türle ilgili aktif bileşiklerin izole edilmesi ve tanımlamasını amaçlayan daha fazla araştırma yapılmalıdır.