Determination of the Physicochemical Properties of Piroxicam

Mustafa ÇELEBİER,Merve NENNİ,Ozan KAPLAN,Emrah AKGEYİK,Mustafa Sinan KAYNAK,Selma ŞAHİN

Özet

Objectives: The aim of this study was to determine the acid dissociation constant (pKa) of piroxicam using high performance liquid chromatography (HPLC) and ultraviolet-visible (UV-Vis) spectrophotometry, and to determine the partition coefficient (Log P), distribution coefficient (Log D), and “Log kw” values of piroxicam using HPLC. Materials and Methods: The HPLC studies were performed on a reversed-phase ACE C18 (150x4.6 mm ID, 5 μm) column at a flow rate of 1.0 mL min-1. The detector was set to 360 nm. Log D at different pH values (3.0-6.5) was examined with a phosphate buffer (20 mM) and acetonitrile (30:70 v/v) mixture as the mobile phase. For pKa determination, HPLC studies were performed with a mixture of phosphate buffer (20 mM) and methanol within the pH range of 3.50-6.00. Log kw measurements were performed with phosphate buffer (20 mM) and MeOH (from 20:80 v/v to 10:90 v/v) mixtures within the pH range of 3.50-6.00. UV-Vis spectrophotometric pKa measurements were performed at 285 nm wavelength. Results: The pKa value of piroxicam was found to be 5.3 by HPLC and 5.7 by UV-Vis spectrophotometry. Log P of piroxicam was determined as 1.58 in our experimental conditions. Log D values were 1.57, 1.57, 1.44, 1.13, and 0.46 for pH values of 3.17, 3.79, 4.44, 5.42, and 6.56, respectively. Conclusion: In the literature, different Log P (3.1, 2.2, and 0.6) and pKa (6.3 and 4.8) values were reported for piroxicam. The Log P (1.58) and pKa (5.3 and 5.7) values obtained for piroxicam in our study were within the range of the literature values. All these results indicate that different experimental approaches used for the determination of physicochemical properties could provide different values. Although UV spectrophotometry is easy to apply, HPLC is a unique technique for simultaneous determination of pKa, Log D, and Log P values of compounds.

Abstract

Amaç: Bu çalışmanın amacı, yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) ve ultraviyole-görünür bölge (UV-GB) spektrofotometresi kullanılarak piroksikamın asit ayrışma sabitinin (pKa) bulunması; HPLC kullanılarak partisyon katsayısı (Log P), dağılım katsayısı (Log D) ve “Log kw” değerlerininin belirlenmesidir.Gereç ve Yöntemler: HPLC çalışmaları, 1,0 mL min-1 akış hızında ters faz kromatografisinde ACE C18 (150x4,6 mm ID, 5 μm) kolon kullanılarak gerçekleştirildi. Detektör 360 nm’ye ayarlandı. Farklı pH değerlerinde (3,0-6,5) Log D değeri, hareketli faz olarak fosfat tamponu (20 mM): asetonitril (30:70 h/h) karışımı ile incelendi. pKa’nın belirlenmesi için HPLC çalışmaları, 3,50 ve 6,00 pH aralığında fosfat tamponu (20 mM): metanol karışımı ile gerçekleştirildi. Log kw ölçümleri, pH 3,50 ila 6,00 arasında bir pH aralığında fosfat tamponu (20 mM): MeOH (20:80 h/h ile 10:90 h/h) karışımları ile yapıldı. UV-GB spektrofotometrik pKa ölçümleri 285 nm dalga boyunda gerçekleştirildi.Bulgular: Piroksikamın pKa değeri sırasıyla HPLC ile 5,3 ve UV-GB spektrofotometresi ile 5,7 olarak bulundu. Deney şartlarımızda piroksikamın Log P değeri 1,58 olarak bulundu. Log D değerleri, sırasıyla 3,17, 3,79, 4,44, 5,42 ve 6,56 pH değerleri için 1,57, 1,57, 1,44, 1,13 ve 0,46 olarak bulundu.Sonuç: Literatürde, piroksikam için farklı Log P (3,1, 2,2 ve 0,6) ve pKa (6,3 ve 4,8) değerleri bildirilmiştir. Çalışmamızda piroksikam için elde edilen Log P (1,58) ve pKa (5,3 ve 5,7) değerleri literatür değerleri arasındaydı. Tüm bu sonuçlar, fizikokimyasal özelliklerin belirlenmesinde kullanılan farklı deneysel yaklaşımların farklı değerler verebileceğini göstermektedir. UV spektrofotometresinin uygulanması kolay olsa da, HPLC, bileşiklerin pKa, Log D ve Log P değerlerinin eşzamanlı olarak belirlenmesi için eşsiz tekniklerden biridir.