Assessment of Protective Effects of Methanolic Extract of Salvia verbenaca Roots Against Oxidative Damage Induced by Hydrogen Peroxide

Hidrojen Peroksitin Neden Olduğu Oksidatif Hasara Karşı Salvia verbenaca Köklerinin Metanol Ekstresinin Koruyucu Etkilerinin Değerlendirilmesi

Özet

Objectives: Salvia verbenaca is a medicinal plant that has been traditionally used in Algeria for the treatment of wounds and emptied abscesses. The present study aimed to evaluate the cytotoxicity of methanolic extract of S. verbenaca roots and explore its ability to bestow protection against oxidative damage induced by H2 O2 (200 µM). Materials and Methods: The cytotoxic effects and protective properties of S. verbenaca on human monocytic leukemia cells (THP-1) was studied using thiazolyl blue tetrazolium bromide assay. The protective effects of the extract against H2 O2 -induced oxidative damage was evaluated using single cell gel electrophoresis (comet) assay and 2,7-dichlorodihydrofluorescien diacetate (H2DCFDA) assay. Results: S. verbenaca extract was found to be non-cytotoxic at concentrations <500 µg/mL. However, the use of 500 and 1000 µg/mL of the extract decreasedcell viability. H2DCFDA assay provided evidence for anti-oxidative properties of S. verbenaca. Addition of S. verbenaca (1 and 10 µg/ mL) resulted in significant reductionin H2 O2 -induced reactive oxygen species (ROS) production. Further, comet assay showed that addition of the extract resulted in a significant reductionin the length and % DNA content of comet tail. Additionally,nuclei in the cells also appeared to be devoid ofdegradation. Conclusion: The use of S. verbenaca root extract conferred protection against H2 O2 -induced ROS production and DNA breakage in vitro.

Abstract

Amaç: Salvia verbenaca, Cezayir’de geleneksel olarak yaraların ve boşalan apselerin tedavisinde kullanılan tıbbi bir bitkidir. Bu çalışma, S. verbenaca köklerinin metanol ekstresinin sitotoksisitesini değerlendirmeyi ve H2 O2 (200 µM) ile indüklenen oksidatif hasara karşı koruyucu etkisini araştırmayı amaçlamaktadır. Gereç ve Yöntemler: S. verbenaca’nın insan monositik lösemi hücrelerindeki (THP-1) sitotoksik etkileri ve koruyucu özellikleri tiyazolil mavi tetrazolyum bromür testi ile belirlendi. Ekstrenin H2 O2 kaynaklı oksidatif hasara karşı koruyucu etkileri, tek hücre jel elektroforezi (comet) testi ve 2,7-diklorodihidroflorescien diasetat (H2DCFDA testi) kullanılarak değerlendirildi. Bulgular: S. verbenaca ekstresinin <500 µg/mL konsantrasyonlarında sitotoksik olmadığı bulundu. Bununla birlikte, 500 ve 1000 µg/mL ekstrenin kullanılması hücre canlılığını azaltmıştır. H2DCFDA testi, S. verbenaca’nın antioksidan özellikleri için kanıt sağlamıştır. S. verbenaca (1 ve 10 µg/ mL) ilavesi, H2 O2 ile indüklenen reaktif oksijen türlerinin (ROS) üretiminde önemli derecede azalma ile sonuçlandı. Ayrıca, comet analizi, ekstrenin eklenmesinin comet kuyruğunun uzunluğunda ve % DNA içeriğinde önemli bir azalmaya neden olduğunu gösterdi. Ek olarak, hücredeki çekirdeklerde degradasyon olmadığı görüldü. Sonuç: S. verbenaca kökü ekstresinin kullanılması, in vitro olarak H2 O2 kaynaklı ROS üretimine ve DNA kırılmasına karşı koruma sağladı.