In vitro activity of methylene blue on Mycobacterium tuberculosis complex isolates

Metilen mavisinin Mycobacterium tuberculosis kompleks izolatlarına in vitro etkisi

Özet

Methylene blue is used for bacterial staining in microbiology and as an antidote drug in medicine. In this study, we aimed to investigate the antimicrobial effects of methylene blue against Mycobacterium tuberculosis complex clinical isolates. Seventeen stored M. tuberculosis complex clinical isolates were included in the study. The isolates were inoculated into Mycobacteria Growth Indicator Tubes and incubated in Automated Mycobacterial Detection System. Mycobacteria Growth Indicator tubes containing methylene blue at critical concentrations of 0.2, 2, 20, 1000 µg ml-1 and control tube were prepared. Antimicrobial susceptibility testing was performed using Automated Mycobacterial Detection System which is gold standard for second line anti-tuberculosis drug testing. At the end of the study, six clinical isolates were susceptible to methylene blue at all critical concentrations. Five isolates were susceptible to only 1000 µg ml-1 methylene blue. Three isolates were susceptible to 1000 and 20 µg ml-1 methylene blue. Susceptibility rate was found as 94% when the critical proportion was accepted 400 GU (1/100 of control). Significant relationship was observed between the administered methylene blue concentrations and bacterial survival rate in statistical analysis. We conclude that methylene blue may become a potential anti-tuberculosis agent due to its well-known side effects and dosing regimens.

Abstract

Metilen mavisi mikrobiyolojide bakteri boyası ve tıpta antidot ilaç olarak kullanmaktadır. Bu çalışmada, metilen mavisinin Mycobacterium tuberculosis kompleks klinik izolatlarına karşı antimikrobiyal etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Önceden saklamaya alınmış 17 Mycobacterium tuberculosis kompleks klinik izolatı çalışmaya alındı. İzolatlar Mycobacteria Growth Indicator Tubes (MGIT) besiyerlerine inoküle edildi ve akabinde Otomatize Mikobakteri Tanımlama Sistemi (OMTS)’nde enkübasyona kaldırıldı. Her izolat için 0.2, 2, 20 ve 1000 µg ml-1 kritik konsantrasyonlarında metilen mavisi içeren MGIT tüpleri ve kontrol tüpü hazırlandı. Antibiyogramlar, ikinci seçenek anti-tüberküloz ilaç duyarlılık testleri için altın standart kabul edilen OMTS kullanılarak yapıldı. Çalışma sonunda, altı klinik izolat tüm kritik konsantrasyonlarda metilen mavisine duyarlı bulundu. Beş izolat ise sadece 1000 µg ml-1 konsantrasyonda metilen mavisine duyarlı olarak tespit edildi. Üç izolat 1000 ve 20 µg ml-1 kritik konsantrasyonda metilen mavisine duyarlı bulundu. Kritik proporsiyon 400 GU (kontrolün 1/100’ü) kabul edildiğinde metilen mavisine duyarlılık oranı %94 olarak hesaplandı. İstatistiki analizde, uygulanan metilen mavisi konsantrasyonları ile bakteriyel sağkalım oranı arasında anlamlı bir ilişki gözlemlendi. Metilen mavisi, bilinen yan etkileri ve var olan doz rejim protokolleri nedeniyle, potansiyel bir anti-tüberküloz ajan olabilir