Effect of Monoclonal Antibody to Human Zona Pellucida 3 in Luteineizing Hormone Receptor Expression, Estradiol Levels and de Graaf Follicles Quantity in Mice

İnsan Zona Pellusidasına Karşı Oluşturulmuş Antikorların Farelerde Luteinizan Hormon Reseptörü İfadesi, Estradiol Seviyesi ve De Graaf Folikülleri Sayısına Etkisi

Özet

Objective: This research aimed to evaluate effect of monoclonal antibody to human Zona Pellucida 3(Mab-hZP3) on luteineizing hormone (LH) receptor expression, estradiol levels and de Graaf follicles quantity of musmusculus mice ovaries.Materials and Methods: True experiment post test only control group design was used as research method. Treatmentsused were control (adjuvant in Tris HCl), and Mab-hZP3 with dosages of 20 µg, 40 µg and 60 µg which tested on day10, 15 and 20. Luteineizing hormone (LH) receptor, estradiol level and the number of de Graaf follicles measurementwere done by immunohistochemical test, ELISA method, and hematoxilin eosin staining, respectively.Results: The results showed that there was no significant difference found on Mab-hZP3 interaction between 20 µg-60µg dosages and 10–20 days of observation time towards LH receptor expression, estradiol level and and the number ofde Graaf follicles. This was related to specificity of monoclonal antibody used.Conclusion: Mab-hZP3 did not lower LH receptor expression, estradiol level and the number of de Graaf folliclesquantity, which means that Mab-hZP3 did not interfere at folliculogenesis and not altering hormones profile. It can beconcluded that Mab-hZP3 has the potential to be a safe immnocontraception material.

Abstract

Giriş: Bu çalışmanın amacı, insan zona pellucidasına karşın oluşturulmuş antikorların (Mab-hZP3), luteinizan hormon (LH) reseptörü, estradiol seviyesi ve mus musculus farelerinde de Graaf foliküllerinin sayısına olan etkisini araştırmaktır. Gereçler ve Yöntemler: Çalışma, kontrol grubunun olduğu, işlem sonrası ölçümlerin yapıldığı yöntem ile yapıldı. Kontrol grubuna Tris HCl içinde adjuvan verilir iken, çalışma gruplarına sırası ile 20 μg, 40 μg ve 60 μg dozlarında Mab-hZP3 verildi ve 10 ve 20. günlerde ölçüm yapıldı. LH reseptörü, estradiol seviyesi ve de Graaf foliküllerinin sayıları sırası ile immünohistokimyasal test ile ELISA metodu kullanılarak ve hemotoksilen-eozin boyaması ile saptandı. Bulgular: Ölçümler, 20 ila 60 μg arasındaki dozlarda uygulanan Mab-hZP3’ün 10-20 günlük gözlemlerde LH reseptörü ifadesini, estradiol seviyelerini ve de Graaf folikülü sayılarını değiştirmediğini gösterdi. Bu durum, kullanılan monoklonal antikorun özgüllüğü ile ilişkili idi. Sonuç: Mab-hZP3 LH reseptörü, estradiol seviyelerini ve de Graaf folikülü sayılarını düşürmez ve böylece folikül oluşumu ve hormon düzeylerini etkilemez. Bu bulgulara göre, Mab-hZP3’ün güvenilir bir bağışıklık temelli doğum kontrolü yöntemi olduğu belirtilebilir