Adenokarsinom Akciğer Kanserlerinde SMAD4 Gen Metilasyonu Etkili Olabilir

Özet

Amaç: Bu çalışmada adenom tipi akciğer kanser olgularında small mothers against decapentaplegic 4 (SMAD4) geninin promotör bölge metilasyonunun etkisini araştırmayı amaçladık. Adenokarsinom ve skuamöz tip karsinomlar akciğer kanserlerinin en sık rastlanan türleridir. SMAD4 geni hücre içi bir sinyal proteinidir. Transkripsiyon faktörlerinden olan bu genin proteini, embriyonik gelişim esnasında doku homeostasisinde görev yapar ve kanserleşme sürecinde etkileri bulunmaktadır. Yöntemler: Bu retrospektif çalışmaya adenokarsinom akciğer kanserli 20 hastanın parafine gömülmüş tümör dokusu ve aynı hastaların normal akciğer dokusu olmak üzere toplam 40 örnek dahil edilmiştir. Parafine gömülü bu adenokarsinomlu akciğer tümör doku ve aynı dokunun normal eşlerinden DNA izolasyonu yapıldıktan sonra, bisülfit modifikasyon sonrası SMAD4 promotör metilasyonunu araştırmak için metilasyon spesifik polimeraz zincir reaksiyonu ve ardından agaroz jel görüntüleme yöntemleri uygulanmıştır. Bulgular: Çalışmamız sonucunda 20 adenokarsinomlu olgunun toplam 12’si (%60) olgunun tümör dokusunda SMAD4 geninin promotör bölgesinde, normal normal dokuya nazaran artmış bir metilasyon varlığı tespit edilmiştir. Bu olguların tümör dokularında normal dokulara göre metilasyonda yaklaşık %25-45 oranında istatistiksel olarak anlamlı bir artış saptanmıştır (p<0.05). Sonuç: Çalışmamız sonucunda SMAD4 gen metilasyonunun akciğer kanserleri için bir tümör belirteci olabileceği ve gen metilasyonu ile SMAD4 protein ekspresyonunun engellenerek hücre içi sinyal yolağının bozulması ve neticesinde kanser gelişimine katkı edebileceğini düşündürmüştür.

Abstract

Objective: In this study, we aimed to investigate the effect of promoter region methylation of small mothers against decapentaplegic 4 (SMAD4) gene in adenoma type lung cancer cases. Adenocarcinoma and squamous type carcinomas are the most common types of lung cancer. SMAD4 gene is an intracellular signal protein. The protein of this gene, which is one of the transcription factors, functions in tissue homeostasis during embryonic development and has effects in the cancer process. Methods: In this retrospective study, a total of 40 samples including 20 paraffin-embedded tumor tissues of 20 patients with adenocarcinoma lung cancer and normal lung tissue of the same patients were included. After DNA isolation from this paraffin-embedded adenocarcinoma lung tumor tissue and its normal counterparts, methylation specific polymerase chain reaction followed by agarose gel imaging methods were applied to investigate the SMAD4 promoter methylation after bisulfite modification. Results: As a result of our study, an increased presence of methylation in the promoter region of the SMAD4 gene in the tumor tissue of a total of 12 (60%) of 20 adenocarcinoma cases compared to normal tissue was detected. A statistically significant increase in methylation rate of approximately 25-45% was found in tumor tissues of these cases compared to normal tissues (p<0.05). Conclusion: As a result of our study, we suggested that SMAD4 gene methylation may be a tumor marker for lung cancers and may contribute to the development of cancer by inhibiting SMAD4 protein expression by gene methylation and disrupting the intracellular signal pathway