On Günlük Civciv Embriyosunda PCR ile Cinsiyet Tayini

Özet

Günlük civcivlerin cinsiyet ayrımı, ırka özgü tüy rengi veya tüy gelişim hızına bağlı olarak ya da özel eğitimli seksörler tarafından kloaktan yapılmaktadır. Civciv embriyosunun erken döneminde, cinsiyetin doğru bir şekilde tanımlaması için DNA’ya dayalı yöntemler geliştirilmektedir. Bu yöntemlerden biri olan PCR tekniğinde kanatlı cinsiyet kromozomların dizilerine (ZZ erkek ve ZW dişi) göre dizayn edilen primerler kullanılır. Bu araştırmada 10 günlük embriyo (n=30) amniyotik sıvılarından elde edilen DNA kullanılarak yapılan PCR çalışmasında W kromozomu üzerindeki Xhol tekrar dizisi ve 18S ribozomal gene ait belirli bölgeler çoğaltılmıştır. Araştırmamızda, PCR ürünlerinin agaroz jel elektroforez bant görüntüsüne göre tek bant (256 bç) veren örnekler erkek, iki bant (256 ve 415 bç) veren örnekler dişi olarak belirlenmiştir. PCR yöntemi ile embriyonun erken dönemlerinde cinsiyet tespiti doğru ve hızlı bir şekilde yapılabilmektedir.

Abstract

Sex of one-day-old chicks are determined by feather characteristics (length or colour) of the breed or line, or vent sexing by highly trained specialist. DNA-based methods are being developed to accurately identify sex in early period of the chick embryos. One of these is the PCR method in which primers are designed according to the sequences of poultry sex chromosomes (ZZ male and ZW female). In this study, Xhol repeat sequence on the W chromosome and specific DNA sequences of the 18S ribosomal gene were amplified by PCR using DNA obtained from amniotic fluid of 10 day old embryos (n=30). On the band image of the gel PCR products, samples generating a single band (256 bp) were determined as male and samples giving two bands (256 and 415 bp) were determined as females. The gender determination in the early stages of the chick embryo can be done accurately and fast by PCR method.