Candida albicans izolatlarına karşı amfoterisin B ile flukonazol ve vorikonazol kombinasyonlarının in vitro etkinliği

Short communication: in vitro activity of amphotericin B with fluconazole or voriconazole combinations against Candida albicans isolates

Özet

Bu çalışmada, amfoterisin B (AMB) ile flukonazol (FLU) ve vorikonazol (VOR) kombinasyonlarının Candida albicans klinik izolatlarına karşı in vitro etkinliğinin "checkerboard" sıvı mikrodilüsyon ve E-test yöntemleri ile araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya, kan, idrar, balgam ve yara örneklerinden izole edilen toplam 30 C.albicans suşu alınmış ve AMB, FLU ve VOR'ün minimal inhibitor konsantrasyon (MİK) değerleri sıvı mikrodilüsyon ve E-test yöntemi ile araştırılmıştır. Test edilen tüm suşlar, her iki yöntemle de bu antifungallere duyarlı bulunmuştur (AMB ve VOR MİK: <1 ug/ml; FLU MİK: <8 ug/ml). Sıvı mikrodilüsyon ve E-test yöntemi arasındaki uyum AMB için %83, FLU ve VOR için %97 olarak saptanmıştır. AMB+FLU ve AMB+VOR kombinasyonlarının etkinliği de hem "checkerboard" sıvı mikrodilüsyon (CSM) hem de E-test yöntemleri ile araştırılmıştır. Kombinasyon testlerinde etkileşim, fraksiyonel inhibisyon konsantrasyon (FİK) indeksi kullanılarak belirlenmiş ve ilaç ilişkileri, FİK indeksine göre sinerjistik, etkisiz ve antagonistik olarak değerlendirilmiştir. AMB+FLU kombinasyonunda CSM yöntemi ile bir suş (%3.3) için sinerji saptanırken, antagonizma saptanmamış; buna karşın E- test ile iki suş (%6.6) için sinerji, dört suş (%13.3) için ise antagonizma saptanmıştır. Her iki yöntemle sinerjik etkinin görüldüğü suşların birbirinden farklı olduğu izlenmiştir. İzolatların 23'ünde (%76.6) bu kombinasyon her iki testle de etkisiz olarak sonuç vermiştir. AMB+VOR kombinasyonunda ise, hem CSM hem de E-test yöntemleri ile suşların ikisi (%6.6) için sinerjik etki saptanmış, ancak yine bu suşların birbirinden farklı olduğu görülmüştür. AMB+VOR kombinasyonunda her iki yöntemle de antagonizmaya rastlanmamış; izolatların 26 (%86.6) için ise bu kombinasyon etkisiz bulunmuştur. CSM ve E-test sonuçları arasındaki uyum %87 olarak hesaplanmıştır. Sonuç olarak çalışmamızda, AMB+azol kombinasyonlarında belirgin bir sinerjik etki saptanmamakla birlikte, antagonistik etkileşimin görülmemesi de umut vericidir. Ancak invazif fungal enfeksiyonların tedavisinde tartışmalı bir konu olan AMB ve azol etkileşimi ile ilgili olarak çok merkezli, geniş kapsamlı, standardize edilmiş yöntemlerin kullanıldığı, in vitro ve klinik çalışmalara gereksinim vardır.

Abstract

The aim of this study was to investigate the in vitro interaction of amphotericin B in combination with fluconazole or voriconazole against Candida albicans clinical isolates by using a broth microdilution checkerboard assay and E-test. A total of 30 C.albiçans strains isolated from blood, urine, sputum and pus samples were included to the study and the minimum inhibitory concentrations (MICs) of amphotericin B (AMB), fluconazole (FLU) and voriconazole (VOR) were determined by broth microdilution method and E-test. All strains tested for susceptibility were interpreted as susceptible by both methods (FLU MICs <8 ug/ml, VOR and AMB MICs <1 ug/ml). The rates of MIC agreement between two methods were as follows: AMB, 83%; FLU, 97%; VOR, 97%. AMB+FLU and AMB+VOR combinations were tested by checkerboard broth microdilution and E-test methods. The combination test results were determined by using the fractional inhibitory concentration (FIC) index as synergistic, indifferent or antagonistic. AMB+FLU combination tested by checkerboard broth microdilution revealed synergy in one strain (3.3%) and antagonism in none, while the same combination tested by E-test revealed synergy in two (6.6%) and antagonism in four (13.3%) strains. The strains which exhibited synergy were different from eachother in two assays. This combination led to indifferent results in 23 (76.6%) of the strains. On the other hand AMB+VOR combination yielded synergistic results in two (6.6%) strains by both of the methods, however, these two strains were again different from eachother. No antagonism was detected by AMB+VOR combination while the combination was indifferent in 26 (86.6%) of the strains. Agreement between the checkerboard and E-test results was 87%. Although significant synergy was not detected in AMB+azole combinations, it was yet hopeful to obtain no antagonism. However, multi-center, large-scale, well standardized in-vitro and clinical studies about AMB and azole interaction which is a matter of debate, are necessary.