Dergiler / Mikrobiyoloji Bülteni / 2008 / Cilt: 42 - Sayı: 2
Alt solunum yolu örnekleri ve solunum yolu dışı örneklerden izole edilen pseudomonas aeruginosa suşlarında siderofor, total matriks proteaz ve elastaz aktivesinin araştırılması
- Sayfa
- 197–208
- DOI
- —
Özet
Önemli fırsatçı patojenler olan Pseudomonas aeruginosa suşları, çeşitli genler aracılığı ile virülans faktörü olarak kabul edilen hücre dışı proteinler salgılamaktadırlar. Adezinler, pyosiyanin, proteazlar, hemolizinler, ekzotoksin A ve ekzoenzim S, P.aeruginosa suşlarında tanımlanmış virülans faktörleridir. Bu çalışmada, hastanede yatan hastaların alt solunum yolu (n: 81; balgam, bronkoalveolar lavaj, trakeal aspirat) ve solunum yolu dışı (n: 76; idrar, yara, kan) örneklerinden izole edilen toplam 157 P.aeruginosa suşunun siderofor, total matriks proteaz ve elastaz aktıviteleri ile antibiyotiklere karşı duyarlılıklarının araştırılması amaçlanmıştır. Siderofor aktivitesinin araştırılmasında "Chrome azurol S" (CAS) agar yöntemi; total matriks proteaz aktivitesinin araştırılmasında substrat olarak "hide powder azure"; elastin aktivitesinin araştırılmasında ise "elastin congo red" kullanılmıştır. Enzim aktiviteleri spektrofometrik olarak ölçülmüş, test edilen suşların enzim aktiviteleri P.aeruginosa PA01 pozitif kontrol suşunun aktivitesi ile karşılaştırılarak değerlendirilmiştir. Tüm suşlar CAS ağarda pozitif reaksiyon vermişlerdir. Total proteaz ve elastaz aktivitesi, test edilen suşlarda PA01 aktivitesinden ortalama olarak daha düşük saptanmış, ancak PAOi'den daha yüksek aktivite gösteren suşların mevcudiyeti de belirlenmiştir. Alt solunum yolu örneklerinden izole edilen suşlar ile diğer örneklerden izole edilen suşlar arasında gerek ortalama total proteaz ve elastaz aktivitesi açısından gerekse antibiyotiklere direnç oranları yönünden fark saptanamamıştır (p<0.05). Her iki grupta da en fazla direnç seftazidim (sırasıyla %67.9 ve %57.9) ve sefoperazona (sırasıyla %49.3 ve %48.7) karşı tespit edilmiştir. Sonuç olarak farklı vücut bölgelerden izole edilen suşların virülans özelliklerinin enfeksiyon gelişimindeki rollerinin aydınlatılabilmesi için ileri in vivo çalışmalara gereksinim olduğu düşünülmüştür.
Abstract
Pseudomonas aeruginosa is an important opportunistic pathogen. P.aeruginosa strains secrete several virulence factors, in the form of extracellular proteins. Adhesins, pyocyanin, proteases, hemolysins, exotoxin A and exoenzyme S are some of the virulence factors found in P.aeruginosa strains. In this study, the presence of siderophore, total matrix protease and elastase activities were investigated in a total of 157 P.aeruginosa strains isolated from lower respiratory tract (n: 81; sputum, bronchoalveolar lavage, tracheal aspirate) and extrarespiratory sites (n: 76; urine, wound, blood) of hospitalized pati ents. Chrome azurol S (CAS) agar plates were used for detection of siderophore activity. Hide powder azure was used for the investigation of total matrix protease activity and elastin congo red was used to test elastase activity. All strains gave positive reaction on GAS agar. Enzyme activities of the test strains were compared with the activity of P.aeruginosa PA01 positive control strain. Mean total matrix protease and elastase activities were less than P.aeruginosa PA01 activity in the test strains, however, some strains exhibited activity higher than PA01. There was no significant difference for mean protease and elastase activities between the strains isolated from lower respiratory tract samples and the others (p<0.05), as well as no difference with respect to antibiotic resistance (p<0.05). It was found that ceftazidime and cefoperazone were the most resistant agents in both groups (67.9% and 57.9% for ceftazidime and 49.3% and 48.7% for cefoperazone, respectively). It was concluded that further in vivo studies are necessary to clarify the role of virulence factors of P.aeruginosa in the establishment of infection in different body sites.