Stafilokoklarda metisilin direncinin farklı yöntemlerle araştırılması ve çoklu antibiyotik direncinin saptanması

Short communication: determination of methicillin resistance in staphylococci with different methods and detection of multiple antibiotic resistance

Özet

Bu çalışmada, çeşitli klinik ve hastane çevresi örneklerinden izole edilen 213'ü Staphylococcus aureus, 43'ü koagülaz negatif stafilpkok (KNS) olmak üzere toplam 256 suşta, oksasilin agar tarama (OAT), PBP2a lateks aglütinasyon (LA), oksasilin disk difüzyon (ODD), sefoksitin disk difüzyon (SDD) ve mikrodilüsyon yöntemleriyle metisilin direncinin belirlenmesi ve bu suşlarda çoklu antibiyotik direncinin saptanması amaçlanmıştır. İzolatların penisilin G, amoksisilin/clavulanat, sefalotin, tetrasiklin, eritromisin, fusidik asit, ofloksasin, vankomisin, ko-trimoksazol ve gentamisine direnç durumları disk difüzyon yöntemi ile araştırılmıştır. Çalışmada OAT yöntemi ile S.aureus izolatlarının 152'si (%71.3); PBP2a LA testi ile de KNS'ların 30'u (%69.7) metisiline dirençli bulunmuştur. Metisiline dirençli ve duyarlı olarak saptanan stafilokok suş sayıları OAT ile sırasıyla 182 ve 74; ODD ile 183 ve 73; SDD ile 181 ve 75; PBP2a LA ile 180 ve 76 ve mikrodilüsyon yöntemiyle 183 ve 73 olarak belirlenmiştir. Uygulanan yöntemler ile alınan sonuçlar arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark bulunmamış (p>0.05), ancak PBP2a LA testinin S.aurues suşlarında metisilin direncinin tespitinde duyarlılığının diğerlerine göre daha düşük olduğu gözlenmiştir. Ayrıca SDD testinin en az ODD testi kadar duyarlı olduğu görülmüş ve tercih edilebileceği düşünülmüştür. Çalışmamızda metisiline duyarlı stafilokokların büyük oranda diğer antibiyotiklere de duyarlı, dirençli olanların ise diğer antibiyotiklere de dirençli oldukları izlenmiştir. Metisiline duyarlı ve dirençli stafilokoklar karşılaştırıldığında, belirlenen direnç oranları farkı fusidik asidin dışında diğer antibiyotikler yönünden istatistiksel olarak da anlamlı bulunmuştur (p<0.05). Tüm stafilokoklarda fusidik aside karşı direnç oranları düşük bulunmuş, vankomisine dirençli suş saptanmamıştır. Sonuç olarak S.aureus izolatlarında metisilin direncinin daha iyi belirlenebilmesi için, CLSl'in de doğrulama testi olarak önerdiği agar tarama testinin ek olarak kullanılması uygun olacağı kanısına varılmıştır.

Abstract

The aims of this study were to determine the methicillin resistance of a total of 256 staphylococcus strains [213 Staphylococcus aureus and 43 coagulase negative staphylococci (CNS)], isolated from different clinical samples and hospital environmental specimens by different methods and to detect multiple antibiotic resistance in these isolates. Methicillin resistance of staphylococci was investigated by using oxacillin agar screening (OAS), oxacillin disk diffusion (ODD), cefoxitin disk diffusion (CDD), PBP2a latex agglutination (l_A) and microdilution tests. The resistance of the strains against penicillin G, amoxycillin/clavulanate, cephalothin, tetracycline, erythromycin, fusidic asid, ofloxacin, vancomycin, co-trimoxazole and gentamicin was investigated by standard disk diffusion method. As a result, 152 (71.3%) S.aureus and 30 (69.7%) CNS isolates were found to be methicillin-resistant with the use of OAS and PBP2a l_A tests, respectively. The numbers of the isolates which were detected as methicillin-resistant and methicillin-susceptible were 182 and 74 by OAS; 183 and 73 by ODD; 181 and 75 by SDD; 180 and 76 by PBP2a LA; 183 and 73 by microdilution tests, respectively. There was no statistically significant differences-between the results obtained by all of the methods (p>0.05), however the sensitivity of PBP2a LA test was lower in the detection of methicillin resistance in S.aureus strains. CDD test which was found to be as sensitive as ODD test, may be preferred in the detection of methicillin resistance in staphylococci. In our study staphylococci which were sensitive to methicillin, were also found generally sensitive to the other antibiotics, whereas staphylococci which were resistant to methicillin were also resistant to the other antibiotics. The difference between methicillin sensitive and resistant staphylococci in terms of the rates of resistance against other antibiotics was found statistically significant with the exception of fusidic acid (p<0.05). The resistance rates of isolates for fusidic acid were very low and all of the strains were susceptible to vancomycin. In conclusion, for better determination of methicillin resistance, agar screening test which is proposed as a confirmatory test by CLSI, should be used when necessary.