Dergiler / Mikrobiyoloji Bülteni / 2016 / Cilt: 50 - Sayı: 1
Trichomonas vaginalis'in Metronidazol, Ornidazol ve Proton Pompa İnhibitörleri Pantoprazol ve Esomeprazole Karşı İn Vitro Duyarlılığı
- Sayfa
- 133–139
- DOI
- —
Özet
Trikomoniyazın güncel tedavisinde 5-nitroimidazol türevleri kullanılmaktadır. Metronidazol, güvenilir, ucuz ve anaerobik mikroorganizmalara ve protozoonlara karşı çok etkili olmasına rağmen, T.vaginalis suşlarının metronidazole karşı geliştirdiği direnç, giderek artan bir sorun haline gelmektedir. Nitroimidazoller, azomisin (2-nitroimidazol) kimyasal yapısına sahip bileşikler olup, Streptomyces suşundan elde edilmektedir. Proton pompa inhibitörlerinin yapısındaki benzimidazol ise, antiprotozoal aktiviteye sahip diğer bileşiklerde de bulunan ortak bir yapıdır. Bu çalışmada, T.vaginalis'in metronidazol, ornidazol ve benzer kimyasal yapılara sahip yeni antiprotozoal ilaçlar olarak denenen proton pompa inhibitörleri pantoprazol ve esomeprazole karşı in vitro duyarlılığı araştırılmıştır. Bu amaçla, laboratuvarımızda önceden izole edilen ve kriyoprezervasyon yapılarak saklanan klinik bir T.vaginalis suşu kullanılmış ve ilaçların bu suşa karşı minimum inhibitör konsantrasyon (MİK) ve minimum letal konsantrasyon (MLK) değerleri, in vitro olarak 24 kuyucuklu hücre kültürü plaklarında dilüsyon yöntemiyle belirlenmiştir. Her bir kuyucuğunda triptikaz maya özütü maltoz besiyeri, at serumu ve antibiyotik (penisilin + streptomisin) içeren plaklara, metronidazol, ornidazol, pantoprazol ve esomeprazol solüsyonları 800, 400, 200, 100, 50 ve 25 ?g/ml ikişer kuyucuk olacak şekilde ilave edilmiş, daha sonra her kuyucuğa 1 ml 5x10³ T.vaginalis trofozoitleri eklenmiştir. Plaklar 37°C'de inkübe edilmiş ve 24, 48 ve 72. saatlerde sayma kamarasında T.vaginalis trofozoitlerinin canlılığı ve hareketliliği açısından ışık mikroskobunda değerlendirilmiştir. MİK ve MLK değerleri 72. saatte metronidazol/ornidazol için sırasıyla 50 ?g/ml ve 100 ?g/ml; pantoprazol için sırasıyla 200 ?g/ml ve 400 ?g/ml; esomeprazol için ise sırasıyla 400 ?g/ml ve 800 ?g/ml olarak saptanmıştır. Sonuç olarak, kullandığımız T.vaginalis suşunun metronidazol ve ornidazole duyarlı olduğu, bununla birlikte pantoprazol ve esomeprazolün de parazite etkili olan alternatif ilaçlar olarak kullanılabileceği kanısına varılmıştır. Ancak proton pompa inhibitörlerinin antiprotozoal etkileri hakkında daha ileri in vitro ve klinik çalışmaların yapılması gerektiği açıktır. Araştırmamız, ulaşılabildiği kadarıyla literatürde esomeprazolün in vitro olarak T.vaginalis üzerine etkisinin araştırıldığı ilk çalışmadır
Abstract
The current treatment of trichomoniasis is based on the use of 5-nitroimidazole derivatives. Although metronidazole is reliable, inexpensive and highly effective against anaerobic microorganisms and protozoa, the development of metronidazole-resistant T.vaginalis strains pose to an increasing problem. Nitroimidazoles are compounds having azomycin (2-nitroimidazole) chemical structure and are obtained from Streptomyces strains. Benzimidazole, which is found in the structure of proton pump inhibitors, is also present in the other components that have antiprotozoal activity. In this study, the in vitro susceptibility of T.vaginalis against metronidazole, ornidazole, and the proton pump inhibitors which are tested recently as antiprotozoal agents; pantoprazole and esomeprazole was investigated. For this purpose a clinical T.vaginalis strain which was formerly isolated and stored after cryopreservation process in our laboratory was used. Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum lethal concentration (MLC) values of those agents against to this strain were determined in vitro by dilution method in 24-well cell culture plates. Trypticase yeast extract maltose medium, horse serum and antibiotic (penicillin + streptomycin) were distributed to each well of cell culture plates and after metronidazole, ornidazole, pantoprazole and esomeprazole solutions were added to two wells for each as 800, 400, 200, 100, 50 and 25 ?g/ml, followed by the addition of 1 ml 5x10³ T.vaginalis trophozoites into each well. Plates were incubated at 37°C, and viability and motility of the trophozoites were evaluated under light microscope at 24, 48 and 72 hours after incubation. MIC and MLC values of metronidazole/ornidazole in the 72th hour were found as 50 ?g/ml and 100 ?g/ml, respectively. MIC and MLC values for pantoprazole in the 72th hour were 200 ?g/ml and 400 ?g/ml, while the values for esomeprazole were 400 ?g/ml ve 800 ?g/ml, respectively. As a result, T.vaginalis strain used in the study was susceptible to metronidazole and ornidazole, besides, it was considered that pantoprazole and esomeprazole were also effective to the parasite and could be used as alternative drugs. However, further in vitro and clinical studies are clearly needed on the antiprotozoal effects of proton pump inhibitors. To our knowledge, this study was the fi rst in literature, which esomeprazole's susceptibility on T.vaginalis was investigated in vitro