Dergiler / Pendik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi / 1999 / Cilt: 30 - Sayı: 2
Brucella abortus S 19 ve Brucella melitensis rev. 1 aşı suşlarının immunojenisitelerinin tespit edilmesi
- Sayfa
- 19–28
- DOI
- —
Özet
Brucella aşı üretiminde kullanılan B.melitensis Rev.l ve B.abortus S19 aşı suşları ile referens B.melitensis Rev.l ve referens B.abortus S19 suşlarının biyolojik belirleyici özellikleri ve CD1 farelerinde Bosseray'ın metodu ile immunojenisiteleri tespit edildi. Biyolojik belirleyici özelliklerin saptanmasında B.melitensis Rev.1 için Thionin. Bazik Fuksin, Penisilin ve Streptomisinli besiyerleri, B.abortus S19 için CO2'ye ihtiyaç, Thionin mavisi, i-eritritol ve penisilinli besiyerlerinde üreme özelliklerinden yararlanıldı. B.melitensis Rev.l ve B.abortus S19 aşı suşlarırnn biyolojik belirleyici özellikleri referens suşlarla aynı bulundu ve saha suşlarından ayrımları yapıldı. B.melitensis Rev. 1 aşı suşunun immunojenisitesi altışar adet CD1 faresinden oluşan toplam 6 grup fare ile tespit edildi. 4 grup fare 0,92x105 CFU test aşısı ile, 1 grup fare 0,98x105 CFU referens aşı ile derialtı yolla aşılandı, bir grup fare aşısız kontrol olarak kullanıldı. Aşılamadan 30 gün sonra tüm fareler 1,92x105 CFU B.aborlus 544 ile periton içi yolla eprüve edildi. B.abortus S19 aşı susunun immunojenisitesi altışar adet CD1 faresinden oluşan toplam 6 grup fare ile tespit edildi. 4 grup fare 1,1 1x105 CFU test aşısı ile, 1 grup fare 1,18x105 CFU referens aşı ile derialtı yolla aşılandı, bir grup fare aşısız kontrol olarak kullanıldı. Aşılamadan 30 gün sonra tüm fareler 2,21x105 CFU B.abortus 544 ile periton içi yolla eprüve edildi. İnokulasyondan 15 gün sonra tüm fareler servikal dislokasyonla öldürülerek dalaklarında tespit edilen B.abortus 544 sayılan X değeri olarak bulundu. X değerleri, log10 (X/logl0x) formülü ile Y değerlerine çevrildi ve gruplardaki standart sapmalar hesaplandı. Grupların tamamının SD değerleri 0,8'm altında bulundu. B.melitensis Rev. 1 aşısında aşısız farelerin Y değeri 4,6±0,1 referens Rev.l aşısının Y değeri l,5±0,4, B.melitensis Rev.l aşısının değerleri ise 1.6±0,4, l,9±0,2, 1,7+0,5 ve 1,7+0,5 olmak üzere ortalama 1.72±0,4 bulundu. B.abortus S19 aşısında aşısız farelerin Y değeri 4,7+0,2, referens S19 aşısının Y değeri l,6±0,4, B.abortus S19 aşısının değerleri ise l,9±0,2, 2,0+0,2, l,6±0,5 ve l,9±0,2 olmak üzere ortalama l,85±0,3 bulundu.
Abstract
The stability of biologic markers and immunogenicity of B.melitensis Rev. 1 and B.abortus S19 strains used in vaccine production were determined and the results were evaluated comparing with reference B.melitensis Rev.l and B.abortus S19 strains obtained from the international referen¬ce centers. The determination of the stability of biologic markers were performed by observing the growth of B.melitensis Rev. 1 strains in media containing thionin, basic fuchsin, penicillin and streptomycin, and by observing the growth of B.abortus S19 strains in media containing thionin blue, i-eritritol and penicillin and by CO2 requirement. Reference and vaccine strains showed the same characteristic patterns for biologic markers and differed from the wild strains. The immunogenicity of the strains was done according to the protocol described in O1E manual. Six grovips of mice each containing six female CD1 mice 5 to 7 weeks old randomly selected were used in the study for each vaccine. Four groups of mice were injected subcutaneously with a suspension containing 1x105 CFU of vaccine to be examined. 1 group of mice was injected with the same amount of reference vaccine and 1 group was t aken as unvaccinated control group. All mice were challenged intraperitoneally with 2x105 of B.abortus 544 thirty days after vaccination. They were killed by cervical dislocation 15 days later and aseptically taken spleens were weighed, homogenised and suspended in nine times of their weights. The total count of B.abortus 544 were found by streaking the suspensions in suitable media and counting the colonies after incubation. Results were first recorded as number of brucella per spleen and labeled as X and expressed as Y by using the formula log(x/logx). Then mean and standart deviationas the response of each group of six mice were calculated. Standart deviation was below 0.8 in all the groups. Y values were 4.6±0,1 for unvaccinated control group, l,5±0,4 for reference Rev.l vaccine and l,72±0,4 as average for B.melitensis Rev.1 test vaccine. The Y values were 4,7±0,2, l,6±0,4 and l,85±0,3 for B.abortus S19 vaccine, respectively.