Dergiler / Iğdır Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Dergisi / 2011 / Cilt: 1 - Sayı: 2
BHK-21 Hücre Hattı üzerinde Şap Hastalığı Virüs Aşısının (O tip) Üretilmesi
- Sayfa
- 155–159
- DOI
- —
Özet
Şap Hastalığı “0” tipi aşısı, bebek Hamster Böbreğinin (BHK) 21 hücre hattında üretilmiştir. BHK-21 hücreleri doku kültürü şişelerinde dönüştürülmüştür. Otuzyedi 0C’ de 48 saatin sonunda mono katmanlar elde edilmiştir. Birleşen mono katmanlara, Şap hastalığı “O”tipi virüsü bulaştırılmıştır. Hücrelerin kümelenmesı ve ayrılması formunda, Sitopatik etki 48 saat sonra gözlenmiştir. Herhangi bir bakteri ve mikoplazma kontaminasyonu için aşı ücretsiz tedarik edilmiştir. Bu virüse (TCID 106/ml) maruz kalan sığır, fare ve kobaylarda sistematik reaksiyonlar gözlenmiştir. Yaklaşık 6-9 aylık yaşa sahip 9 buzağı, güvenlik testi için kullanılan aynı titrede aşı yapılmış ve öldürücü virüse (TCID 104.5/ml) meydan okunmuştur. Tüm hayvanlar bu zorluğa dayanmış ve herhangi bir reaksiyon göstermemiştir. Bu zorluktan sonra, iki aşılanmayan hayvanın her ikisi de tipik Şap hastalığı lezyonu göstermiştir. Şap hastalığı şüphesi olan 10 hayvandan alınan ağız lezyonları toplandı ve bu alan izolatlarının adaptasyonu, BHK 21. Hücre hattı üzerinden geçişlerle gerçekleştirilmiştir. Üç geçişten sonra bu alan izolatlarından herhangi bir viral sitopatik etki elde edilmemiştir. Şüpheli antijenler de Şap hastalığı için dikkate alınmıştır. ELISA testi ile O (60%), A (20%), ve Asia-1 (10%) tiplerinin varlık gösterdiği belirlenmiştir
Abstract
Footh & Mouth Disease (FMD) “O” type vaccine was produced on Baby Hamster Kidney (BHK)-21 cell line. BHK-21 cells were grown in tissue culture flasks. Monolayers were obtained after 48 hours at 37 oC.Confluent monolayers were infected with FMD “O” type virus (TCID50 104.5/ml). Cytopathic effect (CPE) in theform of clumping and detachment of the cells was observed after 48 hours. Vaccine was found free of any bacterialand mycolplasma contamination. Systemic reaction was observed after injecting cattle, mice and guinea pigs withthe virus (TCID50 106/ml). Nine calves of about 6-8 month of age were vaccinated using the same titer used forsafety test and challenged with the virulent virus (TCID50 104.5/ml). All the animals withstood the challenge and didnot show any reaction. Both of the 2 unvaccinated animals after challenge showed typical FMD lesions. Mouthlesions from ten FMD suspected animals were also collected and adaptation of these field isolates was performedby passages on BHK-21 cell line. No viral CPE was obtained from these field isolates after 3 passages. Suspectedantigens were also got typed for FMD. The types O (60%), A (20%), and Asia-1 (10%) were found present usingELISA