Dergiler / Iğdır Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Dergisi / 2017 / Cilt: 7 - Sayı: 2

Hypericum retusum Aucher’in Hücre Süspansiyon Kültürlerinin Optimizasyonu ve Fenolik Bileşen İçeriğinin İncelenmesi

Medium Optimization and Investigation of Phenolic Contents in Cell Suspension Culture of Hypericum retusum Auche

Sayfa
97–105
DOI
—

Özet

Hypericum retusum tıbbi bitki olarak potansiyel bir öneme sahiptir. Bu çalışmada, 6-benziladenin (BAP) vekinetin (KİN)’in 2,4-diklorofenoksiasetik asit (2,4-D) ile kombinasyonlarının, farklı sukroz konsantrasyonlarının(15, 30 ve 50 g L-1), farklı ışık uygulamalarının (Sürekli karanlık, Sürekli aydınlık ve kontrol) ve farklı başlangıç pHdeğerlerinin (pH 4.5, 5.8 ve 6.5), H. retusum’ un hücre süspansiyon kültürlerinde biyokütle birikimi ve farmakolojikolarak önemli beş adet fenolik bileşiğin (hiperisin, hiperosid, klorogenik asit, kuersetin ve psödohiperisin) miktarlarıüzerine etkisini araştırdık. Verilerimiz, H. retusum’ un hücre süspansiyon kültürlerinde en iyi biyokütle birikiminin,0.5 mg L-1 KİN+ 1.0 mg L-1 2,4-D ve 30 g L-1 ilaveli MS besi ortamında, pH’sı 5.8 ve sürekli karanlık şartlar altındaolan ortamdan elde edildiğini ortaya koymuştur. En yüksek fenolik bileşik içeriği, 0.1 mg L-1 BAP+ 0.5 mg L-12,4-D ve 15 g L-1 sukroz ilaveli ve pH’sı 4.5 olan ortamdan elde edilmiştir. Farklı ışık uygulamalarına tabi tutulankültürlerdeki fenolik bileşen içeriği ise uygulamalar arasında farklılık göstermiştir. Bu çalışmayla, H. retusumiçin, fenolik bileşiklerin geniş ölçekli üretimi için muhtemel bir teknoloji sunan yeni bir hücre süspansiyon kültürsistemi geliştirdik.

Abstract

Hypericum retusum has a potential value as a medicinal plant. In this study, we investigated theeffects of different combination of 6-benzyladenine (BAP) and kinetin (KIN) with 2,4-dichlorophenoxyacetic acid(2,4-D), different sucrose concentrations (15, 30 and 50 g L-1) and different light conditions (continuous dark,continuous light and control) and initial pH values (pH 4.5, 5.8 ve 6.5) on the accumulation of biomass and theproduction of fve pharmacologically important phenolic constituents (hypericin, hyperoside, chlorogenic acid,quercetin and pseudohypericin) in cell suspension culture of H. retusum. Our data suggested that the best biomassaccumulations obtained from on MS medium supplemented with 0.5 mg L-1 KİN+1.0 mg L-1 2,4-D, 30 g L-1sucrose, 5.8 pH and under the darkness conditions in cell suspension culture of H. retusum. The highest phenoliccompound contents were obtained from on MS medium containing 0.1 mg L-1 BAP+ 0.5 mg L-1 2,4-D at and 15g L-1 sucrose. The phenolic compound contents of suspension culture under the different light conditions variedamong the treatments. With this study, we have developed a novel cell suspension culture system for H. retusum,suggesting a possible technology for large-scale production of phenolics.

Anahtar kelimeler: Fenolik bileşik, Hücre süspansiyon kültürü, Hypericum retusum Aucher, LC-MS/MS